Anti-RPN2-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P04844

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: RPN2 (Dolichyl-diphosphooligosaccharide--Protein-Glycosyltransferase-Untereinheit 2) Funktion und Lokalisierung

• RPN2, auch bekannt als Ribophorin II (RPN-II) oder RIBIIR, ist die 63 kDa Untereinheit des Oligosaccharyltransferase (OST)-Komplexes. Verwandte Referenzen: PMID:31831667
• Der OST-Komplex katalysiert die kotranslationelle Übertragung eines vorkonfektionierten Glykans (Glc₃Man₉GlcNAc₂) von Dolichylpyrophosphat auf Asparaginreste in N-X-S/T-Konsensusmotiven und leitet damit die Protein-N-Glykosylierung im endoplasmatischen Retikulum (ER) ein.
• RPN2 ist ein integrales Membranglykoprotein mit einer Signalsequenz und einem Transmembrandomäne, das in der ER-Membran in Assoziation mit dem Sec61-Translokon lokalisiert ist.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich N-Glykosylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindungsbildung).
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere RPN2-Isoformen, die möglicherweise die Zusammensetzung und Funktion des OST-Komplexes modulieren.
• RPN2 ist in allen menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert, was seiner Rolle als „Housekeeping“-Gen in der Glykoproteinbiosynthese entspricht.
• 3D-Strukturuntersuchungen haben die Architektur des OST-Komplexes aufgeklärt und Einblicke in die Substraterkennung und den katalytischen Mechanismus gegeben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogensequenz (aa 360-540) entspricht dem C-terminalen Bereich von humanem RPN2, der zwischen humanen, murinen und raten Orthologen hochkonserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot (WB) beträgt das theoretische Molekulargewicht 69 kDa; jedoch ist das native Protein stark glykosyliert und kann mit einem höheren scheinbaren Molekulargewicht wandern. Erwägen Sie die Verwendung eines Entglykosylierungsenzyms, um die Bandenidentität zu bestätigen oder Glykosylierungsheterogenitäten aufzulösen.
• In ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper und validieren die Spezifität unter Verwendung von rekombinantem RPN2-Protein oder Zelllysaten, die das Ziel exprimieren.
• Dieser polyklonale Antikörper kann auch für Immunpräzipitation (IP) oder Immunhistochemie (IHC) untersucht werden, jedoch wird eine gründliche Optimierung im entsprechenden Probensystem empfohlen.

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