Anti-RPN1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P04843

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RPN1-Funktion und -Lokalisierung

• RPN1 kodiert für die Dolichyl-Diphosphooligosaccharid-Protein-Glycosyltransferase 67 kDa Untereinheit, auch bekannt als Ribophorin I (RPN-I), eine Kernkomponente des Oligosaccharyltransferase (OST)-Komplexes.
• Der OST-Komplex katalysiert den initialen Schritt der N-Glykosylierung, indem er ein vorgefertigtes Glykan von Dolichol-Pyrophosphat auf Asparaginreste innerhalb von Asn-X-Ser/Thr-Motiven auf neu synthetisierten Polypeptiden überträgt (PubMed:31831667). Verwandte Referenzen: PMID:31831667
• RPN1 ist ein integrales Membranprotein des endoplasmatischen Retikulums (ER) und assoziiert mit dem Sec61-Translokonkomplex, um die cotranslationale Glykosylierung zu erleichtern.
• Alle OST-Untereinheiten, einschließlich RPN1, sind für die maximale katalytische Aktivität erforderlich, was ihre unverzichtbare Rolle in der Proteinverarbeitung unterstreicht.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die ER-Membran und zusätzlich Melanosomen, wie durch Proteomanalysen identifiziert.
• Ubiquitär in allen getesteten Geweben exprimiert, was mit einer grundlegenden Haushaltsfunktion in der Glykoproteinbiosynthese übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Ubiquitinierung, die die Protein-Stabilität oder Interaktionen regulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 20-280, entsprechend einer konservierten Region von humanem RPN1; Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird basierend auf Sequenzhomologie erwartet.
• Für Western Blot ist das vorhergesagte Molekulargewicht 69 kDa, aber das endogene Protein kann aufgrund von Glykosylierung oder anderen Modifikationen unterschiedlich wandern; erwägen Sie den Einsatz von Deglykosylierungsenzymen, wenn anomale Banden beobachtet werden.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollten Antigen-Retrieval-Methoden optimiert werden, und Gewebe mit hoher sekretorischer Aktivität (z.B. Leber, Bauchspeicheldrüse) können als positive Kontrollen dienen.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in der beabsichtigten Anwendung unter Verwendung geeigneter Kontrollen, wie z.B. Knockdown- oder Knockout-Zelllinien, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA kann die Paarung mit einem Capture-Antikörper oder die Optimierung der Beschichtungsbedingungen erforderlich sein, da diese polyklonale Präparation mehrere Epitop-Reaktivitäten enthält.

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