Anti-RPN1 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P04843

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RPN1

• RPN1, auch bekannt als Ribophorin I (RPN-I) oder Dolichyl-Diphosphooligosaccharid-Protein-Glykosyltransferase 67 kDa-Untereinheit, ist eine Kernuntereinheit des Oligosaccharyltransferase (OST)-Komplexes.
• Der OST-Komplex katalysiert die anfängliche Übertragung eines definierten Glykans (Glc3Man9GlcNAc2) von Dolichol-Pyrophosphat auf Asparaginreste innerhalb der Asn-X-Ser/Thr-Konsensusmotive, der erste Schritt der Protein-N-Glykosylierung (PMID:31831667). Verwandte Referenzen: PMID:31831667
• Die N-Glykosylierung erfolgt kotranslational, und der OST-Komplex assoziiert sich mit dem Sec61-Translokon-Komplex an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums (ER).
• RPN1 ist ein integrales Membranprotein, das an der ER-Membran lokalisiert ist und wurde auch in Melanosomen identifiziert.
• Es wird in allen getesteten Geweben exprimiert, was auf eine ubiquitäre Rolle bei der Glykoproteinsynthese hinweist.
• Alle Untereinheiten des OST-Komplexes sind für maximale enzymatische Aktivität erforderlich, was die wesentliche Rolle von RPN1 bei der effizienten N-Glykosylierung hervorhebt.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Ubiquitinierung und enthält ein Signalpeptid und eine Transmembranhelix.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 22-350) des humanen RPN1. Diese Region ist weitgehend luminal und wird voraussichtlich das native Protein in seiner ER-lokalisierten Konformation erkennen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 68 kDa. Verwenden Sie reduzierende Bedingungen und geeignete Ladekontrollen. Validieren Sie mit Positivkontrolllysaten aus menschlichen, Maus- oder Ratten-Zelllinien (z. B. HeLa, HEK293, NIH/3T3).
• In ELISA kann dieser Antikörper zur direkten Detektion oder Captur von rekombinantem RPN1-Protein verwendet werden; erwägen Sie einen Test gegen die Immunogensequenz oder das Volllängenprotein.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-RPN1 wurde durch Lieferantenvalidierung beobachtet, aber es ist ratsam, die artspezifische Leistung in Ihrem experimentellen System zu bestätigen.
• Bei der Verwendung zur Detektion von endogenem RPN1 beachten Sie, dass das Protein weit verbreitet exprimiert ist; die Expressionsniveaus können jedoch variieren. Eine Optimierung der Antikörperverdünnung kann erforderlich sein.

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