Anti-RPE65 polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - Q16518

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: RPE65-Funktion und Lokalisierung

• RPE65, auch bekannt als p63, BCO3, LCA2 und RP20, ist ein für das retinale Pigmentepithel spezifisches 65-kDa-Protein, das für das Sehen unerlässlich ist.
• Es fungiert als entscheidende Isomerohydrolase im Retinoid-Zyklus und wandelt All-trans-Retinylester in 11-cis-Retinol um, das weiter zum Chromophor 11-cis-Retinal oxidiert wird, welches für die Funktion der Stäbchen- und Zapfen-Photorezeptoren notwendig ist. Zugehörige Referenzen: PMID:16116091 PMID:17848510
• RPE65 wirkt auch als Lutein-Isomerase und katalysiert die Umwandlung von Lutein in Meso-Zeaxanthin, ein augenspezifisches Carotinoid. Zugehörige Referenzen: PMID:28874556
• Die lösliche Form bindet All-trans-Retinol (Vitamin A), während die membranassoziierte, LRAT-palmitoylierte Form All-trans-Retinylester bindet und die Isomerohydrolase-Aktivität erleichtert.
• Subzellulär lokalisiert sich RPE65 im Zytoplasma, in der Zellmembran und in der Mikrosomenmembran.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Palmitoylierung, Phosphorylierung und Acetylierung, regulieren seine Aktivität und Lokalisierung.
• Mutationen im RPE65-Gen verursachen die Leber-Kongenitale Amaurose (LCA2) und Retinitis pigmentosa, was seine entscheidende Rolle für die Gesundheit der Netzhaut unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (AS 274–533) zielt auf eine zentrale Region ab; erwägen Sie die Überprüfung des Nachweises von Volllängen- und potenziell prozessierten Formen in Ihrem System.
• Beim Western Blot sollte eine erwartete Bande bei etwa 61 kDa beobachtet werden; Lysate des retinalen Pigmentepithels können als Positivkontrolle dienen.
• Optimieren Sie für die Immunfluoreszenz an Paraffinschnitten die Antigen-Demaskierung und validieren Sie das Signal im Netzhautgewebe.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-RPE65 wurde berichtet; geeignet für vergleichende Studien zwischen den Spezies.
• Aufgrund der multiplen zellulären Lokalisierungen kann eine subzelluläre Fraktionierung bei der pfadspezifischen Analyse hilfreich sein.

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