Anti-Rpb1 CTD Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P24928

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Rpb1 CTD-Funktion und Lokalisierung

• POLR2A kodiert für Rpb1, die größte katalytische Untereinheit der DNA-abhängigen RNA-Polymerase II (Pol II), die für die Synthese von mRNA-Vorläufern und nicht-kodierenden RNAs verantwortlich ist. Das Enzym verwendet DNA als Matrize und Ribonukleosidtriphosphate zur Polymerisation von RNA und durchläuft Initiations-, Elongations- und Terminationsstadien. (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474, PubMed:8381534, PubMed:9852112) Verwandte Referenzen: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474, PMID:8381534, PMID:9852112
• Die CTD von Rpb1, die 52 Tandem-Heptapeptid-Wiederholungen enthält, dient als Gerüst für Transkriptionsregulatoren. Phosphorylierung an Ser5 (Ser5P) erleichtert den Promotorescape, während Ser2-Phosphorylierung (Ser2P) für die Pausenfreisetzung und Elongation erforderlich ist. Darüber hinaus reguliert die CTD-Lysinacetylierung die Induktion von Immediate-Early-Genen, und Methylierung/Dimethylierung unterdrücken im Allgemeinen die Zielgenexpression. (PubMed:24207025, PubMed:26124092) Verwandte Referenzen: PMID:24207025, PMID:26124092
• Rpb1 besitzt eine 3'→5'-Exonuklease-Aktivität, die neu synthetisierte RNA Korrektur liest und Backtracking sowie Spaltung fehleingebauter Nukleotide ermöglicht. (PubMed:8381534) Verwandte Referenzen: PMID:8381534
• Über seine DNA-abhängige Rolle hinaus zeigt Rpb1 RNA-abhängige RNA-Polymerase-Aktivität, verlängert nicht-kodierende RNAs unter Verwendung einer internen Matrize und kann das Hepatitis-Delta-Virus-Genom replizieren, wenn es mit dem viralen kleinen Delta-Antigen assoziiert ist.
• Rpb1 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert, wo die Transkription stattfindet, wurde aber auch im Zytoplasma und auf Chromosomen nachgewiesen, was mit seinen Rollen in der Transkription und potenziellen extranukleären Funktionen übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen an Rpb1 umfassen Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung, Ubiquitinierung und Sumoylierung, die seine Aktivität und Interaktionen dynamisch regulieren.
• Alternatives Spleißen von POLR2A führt zu mehreren Isoformen, obwohl funktionelle Unterschiede noch vollständig aufgeklärt werden müssen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1611-1710 innerhalb der CTD, was darauf hindeutet, dass der Antikörper Gesamt-Rpb1 oder ein spezifisches CTD-Epitop erkennt; Überprüfen Sie die phospho-abhängige Reaktivität mit Phosphatase-behandelten Proben.
• Für Western Blotting wird das vollständige Rpb1-Protein bei ~217 kDa vorhergesagt; zusätzliche Banden (z. B. ~64 kDa) können Isoformen oder Abbauprodukte darstellen; validieren Sie mit geeigneten Kontrollen.
• Dieser Antikörper wurde in ChIP-Assays eingesetzt; optimieren Sie die Vernetzungs- und Chromatinfragmentierungsbedingungen für Ihre spezifischen Zielorte.
• Für Immunfluoreszenz erwarten Sie eine Kernfärbung; färben Sie zur Bestätigung der Lokalisierung mit einem zytoplasmatischen Marker gegen.

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