Anti-ROCK2-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75116

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ROCK2-Funktion und -Lokalisierung

• Rho-assoziierter Proteinkinase 2 (ROCK2), auch bekannt als ROCK-II oder p164 ROCK-2, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die durch das ROCK2-Gen kodiert wird.
• Sie fungiert als Schlüsselregulator des Aktin-Zytoskeletts und der Zellpolarität und vermittelt glatte Muskelkontraktion, Spannungsfaserbildung, Dynamik der Fokaladhäsionen, Neuritenrückzug und Zellmotilität durch Phosphorylierung mehrerer Substrate, einschließlich ADD1, CNN1, EZR, MYL9/MLC2 und VIM.
• ROCK2 phosphoryliert und aktiviert MAPK1/3 und RPS6KA1 während der myogenen Differenzierung und wirkt als negativer Regulator der VEGF-induzierten angiogenen Aktivierung von Endothelzellen.
• Sie spielt eine wichtige Rolle bei der Zentrosomverduplizierung und trägt zur Erzeugung zirkadianer Rhythmen der vaskulären Kontraktilität bei, indem sie die Phosphorylierung der Myosin-Leichtkette moduliert.
• Subzellulär lokalisiert sich ROCK2 im Zytoplasma, an der Zellmembran, im Zellkern, im Zytoskelett und im Zentrosom.
• Auf Proteinebene wird ROCK2 spezifisch im Gehirn exprimiert, und ihre strukturellen Merkmale umfassen Coiled-Coil-, Zinkfinger- und Kinasedomänen (ATP-Bindung, Magnesium- und Metallbindung).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht dem C-terminalen Bereich (aa 1109–1388) von humanem ROCK2, der die Pleckstrin-Homologie- und Cystein-reichen Domänen umfasst. Dieses Design wird erwartet, um Antikörper zu erzeugen, die Epitope in der C-terminalen Hälfte des Proteins erkennen.
• Für das Western Blotting wird eine Bande von ca. 160–161 kDa in Lysaten aus menschlichen, murinen oder rattengeweblichen Zellen/Geweben erwartet. Fügen Sie geeignete Positivkontrollen wie Gehirnlysat (bekanntes Expressionsgewebe) hinzu und validieren Sie die spezifische Bande mittels siRNA-Knockdown oder konkurrierendem Peptid, falls erforderlich.
• Bei der Immunhistochemie (IHC‑P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist zu berücksichtigen, dass ROCK2 eine breite subzelluläre Verteilung aufweist (Zytoplasma, Membran, Zellkern und Zentrosom); optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen und schließen Sie Isotypkontrollen ein.
• Der Antikörper ist auch für ELISA geeignet; kombinieren Sie ihn mit einem für Ihre Matrix validierten Erfassungs-/Detektionssystem. Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Variation bewertet werden, wenn die Charge gewechselt wird.

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