Anti-ROCK1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, IF, ELISA - Q13464

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ROCK1-Funktion und -Lokalisierung

• ROCK1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase und Mitglied der Rho-assoziierten Coiled-Coil-haltigen Proteinkinase-Familie. Sie ist auch als ROCK-I oder p160ROCK bekannt und wurde als Nierenkarzinom-Antigen NY-REN-35 identifiziert.
• ROCK1 ist ein Schlüsselregulator des Aktin-Zytoskeletts und der Zellpolarität und steuert die glatte Muskelkontraktion, die Aktinorganisation, die Bildung von Stressfasern und Fokaladhäsionen, die Neuritenretraktion sowie die Zelladhäsion und -motilität durch Phosphorylierung von Substraten wie DAPK3, GFAP, LIMK1/2, MYL9/MLC2, PFN1 und PPP1R12A. Verwandte Referenzen: PMID:10436159, PMID:10652353, PMID:11018042
• ROCK1 phosphoryliert FHOD1 und fördert synergistisch SRC-abhängiges, nicht-apoptotisches Membranblebbing. Verwandte Referenzen: PMID:18694941
• Bei UVB-induziertem Stress phosphoryliert ROCK1 JIP3 und reguliert die Rekrutierung von JNK an JIP3. Verwandte Referenzen: PMID:19036714
• Fungiert als negativer Regulator der VEGF-induzierten angiogenen Aktivierung von Endothelzellen. Verwandte Referenzen: PMID:19181962
• Fördert die terminale Differenzierung von Keratinozyten. Verwandte Referenzen: PMID:19997641
• Spielt eine Rolle bei der terminalen Erythrozytendifferenzierung. Verwandte Referenzen: PMID:21072057
• ROCK1 lokalisiert im Zytoplasma, Zytoskelett, Zentrosom, Zentriol, Golgi-Apparat-Membran und Zellmembran. Sie findet sich auch an Zellprojektionen, einschließlich Blebs, Lamellipodien und Ruffles.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 400–660 innerhalb der N-terminalen Hälfte von ROCK1, was die Erkennung des Volllängenproteins und möglicherweise einiger Isoformen ermöglichen kann. Überprüfen Sie die Reaktivität im entsprechenden Probenmaterial.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 158 kDa. Verwenden Sie einen geeigneten Gelanteil (z. B. 6–8 % SDS‑PAGE) und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Für die Immunpräzipitation (IP) titrieren Sie die Antikörpermenge und wählen Sie einen geeigneten Bindungs-/Waschpuffer, um die Aufnahmeeffizienz zu maximieren.
• Für die Immunfluoreszenz an Paraffin-schnitten (IF‑P) sollten Sie eine hitzeinduzierte Antigen-Retrieval in Betracht ziehen und sowohl positive als auch negative Kontrollgewebe einbeziehen.
• Für ELISA testen Sie gegen rekombinantes ROCK1-Protein oder native Lysate, um die optimalen Beschichtungs- und Detektionsbedingungen zu ermitteln. Validieren Sie mit bekannten positiven/negativen Proben.

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