Anti-ROCK1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13464

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ROCK1

• ROCK1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die als Masterregulator des Aktin-Zytoskeletts fungiert und essentielle Prozesse wie Zellpolarität, glatte Muskelkontraktion, die Bildung von Stressfasern und Fokalkontakten, Neuritenretraktion, Zelladhäsion und Motilität antreibt. Diese Effekte werden durch Phosphorylierung verschiedener Substrate vermittelt, darunter DAPK3, GFAP, LIMK1, LIMK2, MYL9/MLC2, TPPP, PFN1 und PPP1R12A (PubMed:10436159, PubMed:10652353, PubMed:11018042). Zugehörige Referenzen: PMID:10436159 PMID:10652353 PMID:11018042

• Die Phosphorylierung von FHOD1 durch ROCK1 fördert synergistisch die SRC-abhängige nicht-apoptotische Plasmamembran-Blebbildung (PubMed:18694941). Zugehörige Referenzen: PMID:18694941

• Unter UVB-Stress phosphoryliert ROCK1 JIP3 und moduliert die anschließende Rekrutierung von JNK, wodurch die nachgeschaltete Stresssignalgebung gesteuert wird (PubMed:19036714). Zugehörige Referenzen: PMID:19036714

• ROCK1 reguliert die VEGF-induzierte angiogene Endothelzellaktivierung negativ und begrenzt dadurch übermäßige Angiogenese (PubMed:19181962). Zugehörige Referenzen: PMID:19181962

• ROCK1 ist an terminalen Differenzierungsprozessen beteiligt, trägt zur erythroiden Differenzierung bei (PubMed:21072057) und fördert die terminale Differenzierung von Keratinozyten (PubMed:19997641). Zugehörige Referenzen: PMID:21072057 PMID:19997641

• Subzellulär ist ROCK1 breit verteilt über das Cytoplasma, das Zytoskelett (Zentrosom/Zentriole), die Golgi-Apparat-Membran, die Zellmembran und dynamische Zellvorsprünge einschließlich Blebs, Lamellipodien und Rufeln. Es wird in Blutplättchen nachgewiesen.

• Strukturell enthält ROCK1 eine Kinasedomäne, eine Coiled-Coil-Region und Zinkfingermotive, seine Aktivität wird durch Phosphorylierung und Acetylierung moduliert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Beim Western Blot ist zu beachten, dass vollständiges ROCK1 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 158 kDa aufweist. Wählen Sie den passenden Polyacrylamidgel-Prozentsatz (z. B. 6–8%) und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine. Es wird empfohlen, die Bandspezifität über Peptid-Konkurrenz-Assays oder siRNA-vermittelten Knockdown zu validieren.
• Dieser Antikörper ist für Reaktivität mit Proben von Mensch, Maus und Ratte bestätigt; bei der Verwendung von Lysaten anderer Arten muss die Kreuzreaktivität experimentell überprüft werden.
• Für ELISA-Anwendungen wird empfohlen, den Antikörper mit einem passenden Detektionsantikörper zu paaren und mit rekombinantem ROCK1-Protein oder relevanten biologischen Proben die Linearität und Sensitivität des Standardassays zu etablieren.
• Aufgrund des Immunogen-Designs (ein Peptid innerhalb der Reste 1100–1200) ist zu berücksichtigen, dass das Epitop im C-terminalen Bereich liegt; denaturierende Bedingungen oder partielle Proteolyse können die Detektionseffizienz beeinträchtigen.

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