Anti-ROBO1 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9Y6N7

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ROBO1

• ROBO1 (Roundabout-Homolog 1), auch bekannt als DUTT1 (Deleted in U Twenty Twenty) oder H-Robo-1, ist ein Rezeptor für die Leitproteine SLIT1 und SLIT2.
• Es vermittelt die axonale Navigation an der ventralen Mittellinie des Neuralrohres und die Projektion von Axonen während der neuronalen Entwicklung. Verwandte Referenzen: PMID:10102268, PMID:24560577
• Die Interaktion mit der intrazellulären Domäne von FLRT3 vermittelt die Axonanziehung zu Zellen, die NTN1 exprimieren. Verwandte Referenzen: PMID:24560577
• Das Protein ist an der Zellmembran, in Axonprojektionen und der Membran des intermediären Kompartiments zwischen Endoplasmatischem Retikulum und Golgi-Apparat lokalisiert.
• Es ist mit Ausnahme der Niere in allen Geweben weit verbreitet exprimiert.
• ROBO1 reguliert die Zellmigration durch Interaktion mit MYO9B, was zu einer Erhöhung des Gehalts an aktivem, GTP-gebundenem RHOA führt. Verwandte Referenzen: PMID:26529257
• Das Protein enthält Immunglobulindomänen, Fibronectin-Typ-III-Wiederholungen und eine Transmembrandomäne und unterliegt Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung.
• Alternativ gespleißte Isoformen und krankheitsassozierte Varianten (z. B. CPHD8, Zwergwuchs, geistige Behinderung) unterstreichen seine Bedeutung für Entwicklung und Krankheit.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Erwarten Sie bei Western Blot eine Bande um 181 kDa; verwenden Sie Molekulargewichtsmarker und validieren Sie mit einem bekannten Positivkontrolle (z. B. HEK293 oder Mausgehirnlysat).
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1452–1651 im C-terminalen Bereich; bestätigen Sie die Spezifität durch Vorinkubation des Antikörpers mit dem Immunogenpeptid in Blockierungsexperimenten.
• Verwenden Sie für IF/ICC geeignete Zelllinien, die ROBO1 exprimieren (z. B. Neuroblastom- oder kortikale Neuronenkulturen) und führen Sie Permeabilisierungsschritte durch; Co-Färbung mit Axonmarkern kann zur Verifizierung der Lokalisierung beitragen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist dieser Antikörper für Nagetiermodelle der Neuroentwicklung geeignet; führen Sie eine anfängliche Titrierung für die vorgesehene Spezies durch.
• Erwägen Sie im ELISA die Verwendung von rekombinanten ROBO1-Ekdomänenfragmenten als Capture-Reagenzien und validieren Sie mit SLIT1/2-Bindungswettbewerbsassays.

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