Anti-RNF8 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O76064

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RNF8

• RNF8 ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die eine zentrale Rolle bei der DNA-Schadenssignalisierung spielt, indem sie die 'Lys-63'-verknüpfte Ubiquitinierung der Histone H2A und H2AX an Doppelstrangbrüchen (DSB) vermittelt und dadurch die Rekrutierung von DNA-Reparaturproteinen wie TP53BP1 und BRCA1 fördert (PubMed:18001824, 18006705). Verwandte Referenzen: PMID:18001824, PMID:18006705
• Es katalysiert außerdem 'Lys-48'-verknüpfte Polyubiquitinketten, die Substrate wie JMJD2A/KDM4A für den Abbau markieren. Dies legt H4K20me2-Markierungen frei und erleichtert die Rekrutierung von TP53BP1 an DNA-Schadensstellen (PubMed:11322894, 14981089, 17724460). Verwandte Referenzen: PMID:11322894, PMID:14981089, PMID:17724460
• RNF8 trägt zur Reparatur von Quervernetzungen zwischen Strängen und zur Aktivierung des Fanconi-Anämie-Signalwegs durch H2A/H2AX-Ubiquitinierung bei und fördert die nicht-homologe Endverbindung durch Abbau von KU80/XRCC5.
• Es ist an der Dekompaktierung höhergeordnetem Chromatin beteiligt und reguliert Histonmodifikationen, einschließlich der H2B-Ubiquitinierung und H4K16-Aetylierung, um die Aktivierung der ATM-Kinase zu erleichtern.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst den Kern, das Zytoplasma, den Midbody und die Telomere, was mit seinen Rollen bei der DNA-Reparatur, Mitose und Telomererhaltung übereinstimmt.
• Es ist ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Gehalten im erwachsenen Gehirn und Hoden, und spielt eine entscheidende Rolle bei der Spermatogenese durch Vermittlung des Histonaustauschs.
• Weitere Funktionen umfassen die Immun-Klassenwechsel-Rekombination (PubMed:22865450) und die potenzielle Regulation der transkriptionellen Aktivität von RXRA. Verwandte Referenzen: PMID:22865450

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting eignen sich Ganzzelllysate aus humanen, Maus- oder Ratten-Zelllinien; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 56 kDa, aber posttranslationale Modifikationen können zu zusätzlichen Banden führen.
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet; verwenden Sie als Positivkontrolle das rekombinante Immunogen (Aminosäuren 230-485).
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Chargenkonsistenz überprüft werden; validieren Sie die Leistung im spezifischen experimentellen Kontext.
• Um die Detektion der DNA-schadensbezogenen RNF8-Aktivität zu verbessern, induzieren Sie DSB vor der Probenvorbereitung mit ionisierender Strahlung oder chemischen Agenzien.

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