Monoklonaler Anti-RNF7-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q9UBF6

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RNF7

• RNF7 (SAG, ROC2, RBX2, CKBBP1) ist ein RING-Box-Protein und die katalytische Komponente mehrerer Cullin-5-RING-E3-Ubiquitin-Protein-Ligase (ECS)-Komplexe. Diese vermitteln die Ubiquitinierung und proteasomale Degradation von Zielproteinen und regulieren dadurch den Zellzyklusablauf, die Signaltransduktion und die Transkription.
  Verwandte Literatur:
  PMID:21980433
  PMID:33268465
  PMID:38418882

• In verschiedenen SOCS-Box enthaltenden ECS-Komplexen dirigiert RNF7 über spezifische Adaptoren wie SOCS2, ASB9, SPSB3, RAB40C, ASB7 und LRRC58 ein breites Spektrum an Substraten zum Abbau, darunter EPOR, GHR, CKB, CGAS, ANKRD28, SUV39H1, BTRC und CDO1 (PubMed:21980433, PubMed:25505247, PubMed:33268465, PubMed:38418882, PubMed:35512830, PubMed:40440427, PubMed:27910872, PubMed:40963025).
  Verwandte Literatur:
  PMID:21980433
  PMID:25505247
  PMID:33268465
  PMID:38418882
  PMID:35512830
  PMID:40440427
  PMID:27910872
  PMID:40963025

• RNF7 katalysiert spezifisch die Neddylierung von Cullin-5 (CUL5) durch Interaktion mit UBE2F und nedyliert keine anderen Culline (PubMed:19250909).
  Verwandte Literatur:
  PMID:19250909

• Die subzelluläre Lokalisation umfasst sowohl das Zytoplasma als auch den Zellkern.

• Wird überwiegend in Herz, Leber, Skelettmuskel und Bauchspeicheldrüse exprimiert, mit sehr geringen Gehalten in Gehirn, Plazenta und Lunge.

• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; das Protein enthält eine Zinkfinger-Domäne vom RING-Typ, die für die E3-Ligase-Aktivität essenziell ist, und wird im Ubiquitin-Konjugationsweg als Transferase klassifiziert.

• Spielt eine Rolle beim Schutz von Zellen vor Apoptose, induziert durch Redox-Agenzien (PubMed:10082581).
  Verwandte Literatur:
  PMID:10082581

• Während einer HIV-1-Infektion wird RNF7 vom viralen Vif-Protein missbraucht, um einen ECS-Komplex zu bilden, der die wirtseigenen Proteine APOBEC3F und APOBEC3G zum Abbau dirigiert und so die angeborene antivirale Abwehr neutralisiert.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht dem N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1–113) von humanem RNF7. Diese Region ist wahrscheinlich über Spezies hinweg gut konserviert, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität gegenüber Maus und Ratte übereinstimmt.
• Für Western Blotting (WB) empfehlt sich ein Anfangsverdünnungsbereich von 1:500–1:2000 und die Verwendung eines Molekulargewichtsmarkers, der die erwartete ~13 kDa-Bande für RNF7 enthält.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) validieren Sie den Antikörper mit positiven und negativen Kontrollgeweben und optimieren Sie die Bedingungen für die Antigen-Retrieval. Führen Sie bei Bedarf eine zusätzliche Validierung in Maus- oder Rattengeweben durch.
• Für ELISA-Anwendungen kann das rekombinante Immunogen als Positivkontrolle zur Bewertung der Antikörperbindung verwendet werden.
• Aufgrund der Beteiligung von RNF7 an Ubiquitinierungswegen erwägen Sie bei Bedarf die Verwendung geeigneter Inhibitoren (z. B. Proteasominhibitoren) zur Stabilisierung von Zielproteinen in Funktionsassays.
• Validieren Sie immer die Leistung des Antikörpers in Ihrem spezifischen experimentellen System und Probetyp.

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