Anti-RNF40 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – O75150

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RNF40/BRE1B

• RNF40 codiert die E3-Ubiquitin-Protein-Ligase BRE1B, auch bekannt als 95 kDa Retinoblasoma-assoziiertes Protein (RBP95) und RING-Finger-Protein 40. Es ist ein Mitglied der RING-Typ E3-Ubiquitin-Transferase-Familie, gekennzeichnet durch eine RING-Finger-Domäne, die die Zinkbindung und Ubiquitin-Ligase-Aktivität vermittelt.
• BRE1B bildet einen funktionellen Komplex mit RNF20, um die Monoubiquitinierung von Histon H2B an Lysin 120 (H2BK120ub1) zu katalysieren. Diese Modifikation dient als spezifische epigenetische Markierung für die transkriptionelle Aktivierung und ist essenziell für die nachfolgende Methylierung von Histon H3 an Lysin 4 und Lysin 79 (H3K4me und H3K79me).
• Durch seine Rolle bei der H2B-Ubiquitinierung ist der RNF20/40-Komplex zentral für den Histon-Code und die Genregulation. Er ist für die transkriptionelle Aktivierung von Hox-Genen und wahrscheinlich vieler weiterer entwicklungs- und proliferationsassoziierter Loci erforderlich.
• BRE1B ist überwiegend im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Funktion bei Chromatinmodifikation und transkriptioneller Kontrolle übereinstimmt.
• Das Protein wird in allen menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert, mit höheren Gehalten in Hoden, Herz und Bauchspeicheldrüse und geringeren Gehalten in Lunge, Skelettmuskel und Dünndarm.
• Posttranslationale Modifikationen von BRE1B umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität, Stabilität oder Proteininteraktionen regulieren können. Durch alternatives Spleißen werden mehrere Isoformen gebildet.
• Im Kontext von mikrobiellen Infektionen wurde nachgewiesen, dass BRE1B den lytischen Zyklus des menschlichen Herpesvirus 8 (KSHV) fördert, indem es die Expression lytischer viraler Gene einschließlich des Master-Latenzschalter-Gens RTA/ORF50 induziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Region innerhalb der Reste 231–431 des menschlichen RNF40, sodass der Antikörper die volle Länge und bestimmte Isoformvarianten erkennen kann. Validieren Sie die Spezifität in Ihrem Modellsystem.
• Für Western Blot beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht etwa 114 kDa; verwenden Sie geeignete Beladungskontrollen und überprüfen Sie die Bandenidentität mit relevanten Lysaten.
• Bei IHC-P optimieren Sie die Antigenrückgewinnungsbedingungen und erwarten Sie Kernfärbung entsprechend der subzellulären Lokalisation des Proteins.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung eines rekombinanten RNF40-Proteins als Standard, um die Antikörperbindung und Assayleistung zu quantifizieren.
• Die Kreuzreaktivität ist für Mensch und Maus bestätigt; für andere Spezies überprüfen Sie die Sequenzhomologie in der Immunogenregion vor der experimentellen Verwendung.
• Als Kaninchen-monoklonaler Antikörper bietet er hohe Affinität und Chargenreproduzierbarkeit, was ihn für robuste und konsistente Ergebnisse in Forschungs- und Diagnoseanwendungen geeignet macht.

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