Anti-RNF34 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC und ELISA - Q969K3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RNF34

• RNF34 ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die die Ubiquitin-vermittelte proteasomale Degradation von Zielproteinen, darunter CASP8 und CASP10, katalysiert und dadurch die extrinsische Apoptose negativ reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:15069192
• Es ubiquitiniert p53/TP53 direkt, targeted es für den proteasomalen Abbau und reguliert dadurch p53-abhängige zelluläre Funktionen negativ. Verwandte Referenzen: PMID:17121812
• RNF34 reguliert p53/TP53 indirekt, indem es die Ubiquitinierung und Degradation von SFN (14-3-3 sigma), einem p53-Stabilisator, vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:18382127
• Es vermittelt die proteasomale Degradation von PPARGC1A (PGC-1α) und beeinflusst dadurch den Stoffwechsel von braunen Fettzellen und die Energiehomöostase. Verwandte Referenzen: PMID:22064484
• Durch Lys-48-verknüpfte Polyubiquitinierung von NOD1 fördert RNF34 dessen proteasomalen Abbau, was auf eine Rolle bei der Regulation der angeborenen Immunität hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:25012219
• Das Protein ist an der Zellmembran, im Endomembransystem, im Zellkern (einschließlich Kernkörperchen) und im Zytosol lokalisiert.
• RNF34 wird ubiquitätär in Geweben wie Herz, Gehirn, Leber, Skelettmuskel, Niere, Bauchspeicheldrüse, Milz, Thymus, Prostata, Hoden, Ovar, Dickdarm und Leukozyten exprimiert.
• Zu den strukturellen Merkmalen gehört eine RING-Typ-Zinkfingerdomäne; das Protein unterliegt alternatives Spleißen und Phosphorylierung, was mit seiner Rolle in Apoptose- und Ubiquitinierungswegen übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen Aminosäuren 1-220 von humanem RNF34. Diese Region kann ausreichend sein, um vollständiges RNF34 nachzuweisen; allerdings kann endogenes RNF34 aufgrund von alternativem Spleißen mehrere Isoformen aufweisen. Erwägen Sie die Validierung der Spezifität des Antikörpers in Ihren Zielzelllinien unter Verwendung geeigneter Kontrollen.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von RNF34 etwa 42 kDa. Es kann eine Bande in der Nähe dieser Größe erwartet werden, allerdings können posttranslationale Modifikationen oder Variabilität der Isoformen zu leichten Verschiebungen führen. Optimieren Sie Blockierung und Antikörperverdünnung für Ihre Proben.
• In der Immunfluoreszenz (IF/ICC) wurde berichtet, dass RNF34 im Zellkern (einschließlich Kernkörperchen), im Zytosol und an der Zellmembran lokalisiert ist. Es sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen getestet werden, um die Antigenität zu erhalten und eine spezifische Färbung zu erreichen.
• Für ELISA kann die polyclonale Natur des Antikörpers eine hohe Empfindlichkeit für den Nachweis von RNF34 in humanen Proben bieten. Fügen Sie Standardkurven und negative Kontrollen hinzu, um die Linearität und Spezifität des Assays sicherzustellen.
• Dieser Antikörper wurde für Kreuzreaktivität mit Menschen validiert. Bei Verwendung für andere Spezies werden eine Sequenzhomologieanalyse und empirische Tests empfohlen.

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