Anti-RNF31 polyklonaler Antikörper für WB, IF, ELISA - Q96EP0

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RNF31

• RNF31 (HOIP) ist die katalytische Komponente des Komplexes für den Aufbau linearer Ubiquitinketten (LUBAC), der über Met1 verknüpfte (lineare) Polyubiquitinketten erzeugt.
• LUBAC konjugiert lineares Polyubiquitin an Substrate wie IKBKG (NEMO) und RIPK1, die für die Aktivierung des kanonischen NF-κB- und des JNK-Signalwegs essenziell sind. Zugehörige Referenzen: PMID:17006537, PMID:19136968, PMID:20005846
• Die lineare Ubiquitinierung durch LUBAC verhindert den TNF-induzierten Zelltod und Entzündungsprozesse, was seine antiapoptotischen und entzündungshemmenden Funktionen hervorhebt. Zugehörige Referenzen: PMID:21455173, PMID:28189684
• RNF31 wird über durch BIRC2/3 gebildete Polyubiquitin-Gerüste in den TNF-Rezeptor-Signalkomplex rekrutiert, wo es Komponenten linear ubiquitiniert, um den Komplex zu stabilisieren. Zugehörige Referenzen: PMID:20005846, PMID:27458237
• Bei der angeborenen Immunität konjugieren RNF31 und LUBAC lineare Polyubiquitinketten an zytosolische Bakterien, wodurch ein „Eat-me“-Signal für die Xenophagie entsteht und die NF-κB-Aktivierung gefördert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:28481331, PMID:34012115
• RNF31 ubiquitiniert außerdem BCL10 linear, um die TCR-induzierte NF-κB-Signalübertragung zu verstärken, und ist während der Angiogenese an der Regulation des Wnt-Signalwegs beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:27777308, PMID:23708998
• Überwiegend im Zytoplasma lokalisiert, was seiner Rolle in zytosolischen Signalkomplexen und bei der Bildung bakterieller Beschichtungen entspricht.
• Wird sowohl in normalen als auch in transformierten Brustepithelzelllinien exprimiert, mit posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierungen und Zinkbindungsdomänen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäurereste 500-700, eine Region, die voraussichtlich oberflächenzugänglich und spezifisch für RNF31 ist, wodurch die Kreuzreaktivität mit anderen RING-Finger-Proteinen reduziert wird.
• Beim Western Blot ist eine Bande in der Nähe von 120 kDa zu erwarten; optimieren Sie die Bedingungen für Beladung und Transfer großer Proteine.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF-P) kann je nach Zelltyp und Aktivierungszustand eine Färbung des Zellkerns und des Zytoplasmas beobachtet werden; geeignete Kontrollen sollten einbezogen werden.
• Für den ELISA sollte der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden, nachdem die Reaktivität mit nativem und rekombinantem RNF31 bestätigt wurde.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem RNF31 wurde berichtet. Aufgrund möglicher artspezifischer Unterschiede sollte die Reaktivität jedoch in Ihrem experimentellen System validiert werden.

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