Anti-RNF20 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q5VTR2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RNF20 (BRE1A) Funktion und Lokalisierung

• RNF20 (auch bekannt als BRE1A) ist ein RING-Finger-Protein, das als katalytische Untereinheit des RNF20/40 E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplexes fungiert und spezifisch die Mono-Ubiquitinierung von Histon H2B an Lysin 120 (H2BK120ub1) vermittelt.
• H2BK120ub1 dient als epigenetisches Merkmal, das eine Voraussetzung für die Methylierung von Histon H3 an Lysin-4 und Lysin-79 (H3K4me und H3K79me) ist und eine zentrale Rolle im Histon-Code und der Genregulation spielt.
• Der RNF20/40-Komplex kooperiert mit den E2-Enzymen UBE2A oder UBE2B, um die Histon-H2B-Ubiquitin-Ligase zu bilden, und ist für die transkriptionelle Aktivierung von Hox-Genen erforderlich.
• RNF20 wirkt als transkriptioneller Koaktivator, indem er an den MDM2-Promoter rekrutiert wird, wahrscheinlich durch p53/TP53, und vermittelt zudem die Polyubiquitinierung von Isoform 2 von PA2G4 in Krebszellen, was zu ihrem proteasomalen Abbau führt.
• Das Protein lokalisiert sich ausschließlich im Zellkern, was im Einklang mit seinen chromatinregulierenden Funktionen steht.
• RNF20 wird auf Proteinebene in normalem Hirngewebe und malignen Gliomen exprimiert und unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung als posttranslationale Modifikationen.
• Das Protein enthält eine Coiled-Coil-Domäne und ein Zinkfinger-Motiv, die die Metallbindung und die typische RING-Typ-Ubiquitin-Transferase-Aktivität ermöglichen.
• Während einer mikrobiellen Infektion fördert RNF20 den lytischen Zyklus des humanen Herpesvirus 8 (KSHV), indem er die Expression lytischer viraler Gene induziert, einschließlich des Latenz-Switch-Gens RTA/ORF50.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Western-Blot-Analyse sollten aufgrund der nukleären Lokalisierung von RNF20 Kernfraktionen angereichert werden, um die Detektionsempfindlichkeit zu erhöhen.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität mittels Knockdown- oder Knockout-Kontrollen im entsprechenden Zelllinien- oder Gewebesystem.
• Das synthetische Peptid-Immunogen (Aa 1-100 von menschlichem RNF20) kann als Positivkontrolle in ELISA-Assays verwendet werden, um die Antikörperreaktivität zu bestätigen.
• Da der Antikörper sowohl mit menschlichen als auch mit murinen Proben kreuzreagiert, eignet er sich möglicherweise für Studien in Mausmodellen; es wird jedoch eine Titration und Validierung im spezifischen Probentyp empfohlen.
• Da RNF20 phosphoryliert und acetyliert wird, können unter bestimmten Bedingungen zusätzliche Banden auftreten; Phosphatase- oder Deacetylase-Behandlungen können helfen, die Identität der Banden zu bestätigen.

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