Anti-RNF168 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8IYW5

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RNF168-Funktion und Lokalisierung

• E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die die Monoubiquitinierung von nukleosomalem Histon H2A an Lys-13 und Lys-15 (H2AK13Ub und H2AK15Ub) katalysiert und eine zentrale Rolle in der DNA-Schadensantwort spielt.
• Wirkt mit UBE2N/UBC13 stromabwärts von RNF8, um die Histon H2A- und H2AX-Ubiquitinierung an Doppelstrangbrüchen zu verstärken, fördert die Bildung von 'Lys-63'-verknüpften Ubiquitinketten und die Rekrutierung von Reparaturproteinen wie TP53BP1 und BRCA1.
• Wird auch an DNA-Interstrang-Quervernetzungsstellen (ICL) rekrutiert, wo es die 'Lys-63'-verknüpfte Ubiquitinierung von Histonen H2A und H2AX vermittelt und so die Assemblierung des Fanconi-Anämie(FA)-Komplexes und die Reparatur erleichtert.
• Arbeitet nach DNA-Schäden mit RNF8 zusammen, um JMJD2A/KDM4A zu ubiquitinieren und abzubauen, wodurch die H4K20me2-Markierung freigelegt wird, um das Laden von TP53BP1 an Schadensstellen zu fördern.
• Involviert in den Klassenwechsel-Rekombination im Immunsystem durch Regulierung von Doppelstrangbruch-Reparaturwegen.
• Lokalisiert im Zellkern, wo es durch Bindung an bereits ubiquitinierte Histone H2A und H2AX an DNA-Läsionen rekrutiert wird.
• Gehört zur Familie der RING-Finger-Proteine; enthält eine N-terminale RING-Domäne und C-terminale MIU-Motive, die die Ubiquitin-Bindung vermitteln.
• Klassifiziert als Chromatin-Regulator und DNA-Reparaturfaktor; wichtige biologische Schlüsselwörter sind Metallbindung, Phosphoprotein, Transferase und Ubl-Konjugationsweg.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 300–571 von humanem RNF168, einer Region, die die C-terminalen MIU-Motive umfasst; dieses Design kann die Detektion des Voll-Längen-Proteins bei ~65kDa begünstigen.
• Für Western Blot sollten nukleare Extrakte aus humanen oder murinen Zelllinien getestet werden, da RNF168 im Zellkern lokalisiert ist und seine Expression unter DNA-schädigenden Bedingungen induziert werden kann.
• ELISA kann zum Screening von Hybridoma-Überständen oder zur Quantifizierung von RNF168-Spiegeln verwendet werden; stellen Sie sicher, dass das rekombinante Immunogen oder ein relevantes Peptid als Beschichtungsantigen verwendet wird.
• Da RNF168 in der Ubiquitin-abhängigen Signalübertragung fungiert, sollten während der Probenvorbereitung geeignete Protease- und Deubiquitinase-Inhibitoren verwendet werden, um potenzielle ubiquitinierte Spezies zu erhalten.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität und optimale Verdünnung in Ihrem eigenen experimentellen System, da die Leistung je nach Probentyp und Behandlung variieren kann.

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