Anti-RNF14 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q9UBS8

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RNF14

• Auch bekannt als Androgenrezeptor-assoziiertes Protein 54 (ARA54), HFB30 und RING-Finger-Protein 14. Aufgrund von alternatives Spleißen existieren mehrere Isoformen.
• Wirkt als E3-Ubiquitin-Protein-Ligase im RNF14-RNF25-Signalweg der Translationsqualitätskontrolle und vermittelt die „Lys-6“-verknüpfte Ubiquitinierung von Translationsfaktoren (EEF1A1, ETF1) und Ribosomenproteinen an stillstehenden Ribosomen (PubMed:36638793, PubMed:37651229, PubMed:37951215). Verwandte Referenzen: PMID:36638793, PMID:37651229, PMID:37951215
• Erforderlich für die Auflösung von RNA-Protein-Quervernetzungen, die durch reaktive Aldehyde verursacht werden, und fördert den Abbau quervernetzter Produkte über den VCP/Proteasom-Weg (PubMed:37951215, PubMed:37951216). Verwandte Referenzen: PMID:37951215, PMID:37951216
• Wirkt als Transkriptionsregulator im Wnt-Signalweg durch Interaktion mit den TCF-Transkriptionsfaktoren TCF7/TCF1, TCF7L1/TCF3 und TCF7L2/TCF4 (PubMed:23449499). Verwandte Referenzen: PMID:23449499
• Kann als Koaktivator für androgen- und progesteronabhängige Transkription wirken (PubMed:19345326). Verwandte Referenzen: PMID:19345326
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst sowohl Zytoplasma als auch Zellkern.
• Wird breit in allen Geweben exprimiert.
• Enthält Zinkfingerdomänen und unterliegt Phosphorylierung; klassifiziert unter Transferasen, Ubl-Konjugationsweg und metallbindende Proteine.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus dem internen Bereich (Aa 300–400) von humanem RNF14; dies kann die Erkennung von denaturierten linearen Epitopen begünstigen, wodurch der Antikörper gut für das Western Blotting (WB) unter reduzierenden/denaturierenden Bedingungen geeignet ist.
• Für ELISA-Anwendungen erwägen Sie die Verwendung des immunisierenden Peptids als positives Beschichtungsantigen und validieren Sie die Leistung des Antikörpers mit vollständigen rekombinanten Proteinen oder Zelllysaten aus Mensch, Maus oder Ratte, um die Kreuzreaktivität zu bestätigen.
• Da RNF14 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern exprimiert wird, stellen Sie eine angemessene Fraktionierung oder die Herstellung von Gesamtlysaten sicher, um das Ziel im WB nachzuweisen.
• Überprüfen Sie die Antikörperspezifität durch Tests in RNF14-überexprimierenden oder Knockdown-Zelllinien, falls verfügbar.
• Verwenden Sie geeignete Ladekontrollen (~54 kDa) und bestätigen Sie, dass die beobachtete Bandgröße dem vorhergesagten Molekulargewicht von RNF14 entspricht.

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