Anti-RNF115 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Y4L5

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RNF115-Funktion und Lokalisierung

• RNF115 (auch bekannt als BCA2, ZNF364, Rabring7) ist eine RING-Finger-haltige E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die sowohl 'Lys-48'- als auch 'Lys-63'-gebundene Polyubiquitinierung von Substratproteinen vermittelt und so verschiedene Prozesse wie Autophagie, angeborene Immunität und Zellproliferation reguliert (PubMed:20019814, PubMed:30689267). Verwandte Referenzen: PMID:20019814, PMID:30689267
• Es spielt eine kritische Rolle beim endosomalen Transport und dem lysosomalen Abbau von Membranrezeptoren wie EGFR, FLT3, MET und CXCR4, indem es deren Ubiquitinierung fördert.
• RNF115 ist an der antiviralen Abwehr beteiligt, indem es die BST2-abhängige Internalisierung von HIV-1-Virionen und die BST2-unabhängige Ubiquitinierung von retroviralen GAG-Proteinen erleichtert und sie so für den lysosomalen Abbau markiert (PubMed:20019814, PubMed:24852021). Verwandte Referenzen: PMID:20019814, PMID:24852021
• Während einer Virusinfektion ubiquitiniert RNF115 dynamisch MAVS und STING1: Es katalysiert die 'Lys-48'-gebundene Ubiquitinierung von MAVS für den proteasomalen Abbau und die 'Lys-63'-gebundene Polyubiquitinierung von STING1, um dessen Oligomerisierung und TBK1-Rekrutierung zu fördern (PubMed:33139700). Verwandte Referenzen: PMID:33139700
• Das Protein reguliert die Fusion von Autophagosom und Lysosom positiv, indem es mit STX17 interagiert und dessen Stabilität erhöht, wodurch die Autophagosomenreifung gefördert wird (PubMed:32980859). Verwandte Referenzen: PMID:32980859
• RNF115 reguliert TLR-induzierte proinflammatorische Zytokine negativ, indem es die 'Lys-11'-gebundene Ubiquitinierung von RAB1A und RAB13 katalysiert und so den post-ER-Transport von TLRs hemmt (PubMed:35343654). Verwandte Referenzen: PMID:35343654
• Subzellulär lokalisiert RNF115 im Zytoplasma, Zellkern, endoplasmatischen Retikulum und Golgi-Apparat. Es wird in normaler Brust, Prostata, Lunge und Kolon nur in sehr geringen Mengen exprimiert, zeigt jedoch eine höhere Expression in Herz, Skelettmuskel, Hoden und verschiedenen Krebszellen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und das Protein enthält eine Zinkfinger-Domäne, die für seine E3-Ligase-Aktivität essentiell ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das den Aminosäuren 30-140 des humanen RNF115 entspricht, das in der N-terminalen Region liegt. Dies kann Antikörper erzeugen, die auf Epitope in dieser Domäne abzielen.
• Als polyklonaler Kaninchenantikörper erkennt er voraussichtlich mehrere Epitope, was eine robuste Detektion ermöglichen kann, jedoch mit inhärenter Charge-zu-Charge-Variabilität einhergeht. Forscher sollten jede neue Charge unter ihren spezifischen Assay-Bedingungen validieren.
• Der Antikörper eignet sich für Western-Blotting (WB) und ELISA-Anwendungen. Für WB sollte eine positive Kontrolllysat aus humanen Zelllinien oder Rattengewebe (angesichts der angegebenen Kreuzreaktivität) in Betracht gezogen werden, und das beobachtete Band bei etwa 34 kDa sollte bestätigt werden.
• Es wird eine Kreuzreaktivität mit Ratte angegeben; die Leistung in anderen Spezies sollte jedoch experimentell validiert werden.

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