Anti-RIPK2-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – O43353

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RIPK2

• RIPK2 (Rezeptor-interagierende Serin/Threonin-Proteinkinase 2), auch bekannt als RICK, RIP2, CARDIAK und CARD3, ist eine dualspezifische Kinase, die für die Signalübertragung der angeborenen und adaptiven Immunität essenziell ist. Relevante Referenzen: PMID:14638696 PMID:17054981 PMID:21123652
• Bei der Erkennung bakterieller Peptidoglykanstrukturen rekrutieren NOD1 und NOD2 RIPK2 durch homotypische CARD-CARD-Interaktionen und lösen die Bildung von RIPK2-Filamenten aus, die als Signalplattformen dienen. Relevante Referenzen: PMID:17054981 PMID:17562858 PMID:21123652
• Das rekrutierte RIPK2 wird durch XIAP/BIRC2/BIRC3 K63-verknüpft polyubiquitiniert und durch den LUBAC-Komplex M1-verknüpft linear ubiquitiniert, wodurch es in ein Gerüst für nachgeschaltete Effektoren umgewandelt wird. Relevante Referenzen: PMID:22607974 PMID:28545134 PMID:29452636
• Diese Polyubiquitinketten rekrutieren den IKBKG/NEMO-Adapter und den TAB2/TAB3-TAK1-Komplex, was zur Phosphorylierung von IKK und anschließend zur nukleären Translokation von NF-κB sowie zur Transkriptionsaktivierung führt. Relevante Referenzen: PMID:17562858 PMID:22607974 PMID:29452636 PMID:18079694
• Die Kinaseaktivität von RIPK2 ist für die NOD1/NOD2-Signalübertragung nicht erforderlich; seine primäre Rolle besteht in der Funktion als Gerüstprotein. Relevante Referenzen: PMID:29452636 PMID:30026309
• RIPK2 ist im Zytoplasma, an der Zellmembran und im endoplasmatischen Retikulum lokalisiert und wird in zahlreichen Geweben exprimiert, darunter Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leukozyten, Milz und Niere.
• In der adaptiven Immunität ist RIPK2 an der T-Zell-Rezeptor-Signalübertragung beteiligt, indem es die Phosphorylierung von BCL10 und die Aktivierung von NF-κB fördert. Relevante Referenz: PMID:14638696
• RIPK2 vermittelt außerdem die Src-abhängige Tyrosinphosphorylierung von ARHGEF2 bei der NOD2-Signalübertragung und reguliert die Inaktivierung von RHOA nachgeschaltet von NGFR. Relevante Referenzen: PMID:21887730 PMID:26646181

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das vollständige RIPK2-Protein (AS 1–540), was zur Erkennung mehrerer Isoformen oder posttranslational modifizierter Formen führen kann; bestätigen Sie die interessierende Bande (vorhergesagt ca. 61 kDa) mithilfe geeigneter Kontrollen.
• Validieren Sie beim Western Blot die optimale Antikörperverdünnung für Ihre spezifische Probe und Ihr Detektionssystem; die endogenen RIPK2-Expressionslevel können zwischen verschiedenen Zell- und Gewebetypen variieren.
• Aufgrund der polyklonalen Beschaffenheit ist mit einer möglichen Kreuzreaktivität zu rechnen; überprüfen Sie die Spezifität anhand von RIPK2-Knockout- oder Knockdown-Proben oder durch Peptidblockierung.
• Titrieren Sie den Antikörper bei ELISA-Anwendungen gegen das rekombinante Immunogen oder das native Zielprotein, um den linearen Nachweisbereich zu bestimmen.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit murinem und Ratten-RIPK2; bei der Übertragung auf andere Spezies wird jedoch eine Sequenzalignment-Analyse empfohlen.

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