Anti-RIPK1/RIP monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q13546

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RIPK1-Funktion und -Lokalisierung

• RIPK1, auch bekannt als RIP1 oder Zelltodprotein RIP, ist eine Serin-Threonin-Kinase, die als kritischer Regulator der TNF-vermittelten Apoptose, Nekroptose und Entzündungssignalgebung wirkt (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Verwandte Referenzen: PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280
• Es zeigt kinaseaktivitätsabhängige Funktionen beim Zelltod und kinaseunabhängige Gerüste (Scaffold)-Funktionen beim Zellüberleben, einschließlich der Aktivierung des kanonischen NF-kappa-B-Weges (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Verwandte Referenzen: PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513
• RIPK1 reguliert die Zusammenstellung zweier todinduzierender Komplexe: Komplex IIa (RIPK1-FADD-CASP8) für die Apoptose und Komplex IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) für die Nekroptose.
• Es hemmt die RIPK3-abhängige Nekroptose durch Rekrutierung von CASP8 über FADD, welches RIPK1 spaltet und so die TNF-induzierte Nekroptose begrenzt (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Verwandte Referenzen: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:29440439
• RIPK1 ist vorwiegend im Zytoplasma und an der Zellmembran lokalisiert, was seiner Rolle bei der TNFR1-Signaltransduktion entspricht.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Ubiquitinierung (Isopeptidbindung) und proteolytische Spaltung durch CASP8, die seine pro-tödlichen und pro-überlebenden Funktionen regulieren.
• Es fördert auch die Transkription von proinflammatorischen Zytokinen wie IL-6 und verknüpft so den Zelltod mit Immunreaktionen (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Verwandte Referenzen: PMID:31827280, PMID:31827281

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 289-490 von menschlichem RIPK1, einem Bereich, der einen Teil der Kinasedomäne umfasst; dieses Design kann die Erkennung sowohl der Volllänge als auch der kinasehaltigen Fragmente begünstigen.
• Beim Western Blot ist ein Band bei ca. 76 kDa zu erwarten. Ziehen Sie in Betracht, geeignete Kontrollen einzubeziehen, um Spaltprodukte zu berücksichtigen, die während der Apoptose oder Nekroptose entstehen können.
• Bei der Immunpräzipitation validieren Sie die Antikörperleistung mit bekannten RIPK1-Interaktoren wie TRADD oder FADD unter geeigneten Stimulationsbedingungen (z. B. TNF-Behandlung).
• ELISA-Experimente können zur Quantifizierung von RIPK1 in Zelllysaten oder Gewebshomogenaten optimiert werden; die Kreuzreaktivität mit anderen RIP-Familienmitgliedern sollte bewertet werden.

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