Anti-RIP3/RIPK3 polyklonaler Antikörper für IHC-P und ELISA - Q9Y572

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RIP3

• RIP3 (Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3), auch als RIPK3 bekannt, ist eine Serin/Threonin-Kinase, die sowohl Nekroptose als auch Apoptose aktiviert, zwei parallele Wege des programmierten Zelltods. Zugehörige Referenzen: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• Nach der Aktivierung durch ZBP1 bildet RIPK3 einen nekroseinduzierenden Komplex und phosphoryliert MLKL, was zur Permeabilisierung der Plasmamembran und zum nekroptotischen Zelltod führt. Zugehörige Referenzen: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• RIPK3 reguliert außerdem die extrinsische Apoptose über einen von RIPK1, FADD und CASP8 abhängigen Mechanismus, der unabhängig von MLKL und seiner eigenen Kinaseaktivität ist.
• Das Protein befindet sich überwiegend im Zytosol, kann jedoch auch im Zellkern vorkommen, wo es als Reaktion auf Virusinfektionen, beispielsweise durch Orthomyxoviren, die nukleäre Nekroptose vermittelt.
• RIPK3 wird in der Bauchspeicheldrüse stark exprimiert und ist in geringeren Mengen im Herzen, in der Plazenta, der Lunge und der Niere nachweisbar; seine Expression ist bei Dickdarm- und Lungenkrebs signifikant erhöht.
• In bestimmten Zelltypen schränkt RIPK3 die Virusreplikation über vom Zelltod unabhängige Wege ein, beispielsweise durch die Hochregulierung von ACOD1/IRG1 und der Itaconatsynthese nach einer Infektion mit dem Zika-Virus.
• RIPK3 bindet an die Stoffwechselenzyme GLUL, GLUD1 und PYGL und steigert deren Aktivität, wodurch möglicherweise der Tricarbonsäurezyklus, die oxidative Phosphorylierung und die ROS-Produktion stimuliert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:19498109
• Die Kinase durchläuft Phosphorylierung, Ubiquitinierung und die Bildung von Isopeptidbindungen und unterliegt alternativem Spleißen, was zur funktionellen Vielfalt beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser polyklonale Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid entwickelt, das die Aminosäuren 410-518 (C-terminale Region) des humanen RIP3 umfasst. Es wird erwartet, dass er vollständiges RIP3 erkennt und möglicherweise auch Spleißvarianten mit diesem Epitop nachweist.
• Für IHC-P sollten Sie eine Optimierung der Bedingungen für die Antigen-Retrieval-Methode in Betracht ziehen, beispielsweise hitzevermittelte Citrat- oder EDTA-Puffer, und die Spezifität der Färbung mithilfe geeigneter Gewebekontrollen (positiv und negativ) sowie, wenn möglich, durch Vorabsorption mit dem Immunogenpeptid validieren.
• Stellen Sie beim ELISA sicher, dass das Beschichtungsantigen der Immunogenregion entspricht, oder verwenden Sie ein rekombinantes Protein voller Länge. Überprüfen Sie die Chargenkonsistenz, indem Sie den Antikörper gegen einen bekannten Standard titrieren.
• Als polyklonales Reagenz kann es zu Variabilität zwischen den Chargen kommen; beziehen Sie bei Vergleichen von Ergebnissen aus verschiedenen Experimenten interne Referenzen ein.

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