Anti-RIP3 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9QZL0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: RIP3/RIPK3-Funktion und -Lokalisierung

• Der Rezeptor-interagierende Serin/Threonin-Proteinkinase 3 (RIPK3, auch bekannt als RIP3) ist ein Schlüsselmediator der Nekroptose und Apoptose, zwei parallelen programmierten Zelltodwegen (PubMed:27321907, PubMed:27746097, PubMed:27917412). Verwandte Referenzen: PMID:27321907, PMID:27746097, PMID:27917412
• Die Nekroptose wird durch die Aktivierung von RIPK3 durch ZBP1 ausgelöst, was zur Bildung eines nekroseinduzierenden Komplexes und zur Phosphorylierung von MLKL führt, welches zur Plasmamembran transloziert, um Membranschäden und einen Calciumeinstrom zu verursachen (PubMed:19590578, PubMed:22423968, PubMed:24012422, PubMed:24813849, PubMed:24813850). Verwandte Referenzen: PMID:19590578, PMID:22423968, PMID:24012422, PMID:24813849, PMID:24813850
• Im Zellkern erkennt ZBP1 bei einer Orthomyxovirus-Infektion Z-RNA und aktiviert RIPK3, um MLKL zu phosphorylieren, wodurch die Kernhülle gestört wird und DNA in das Zytosol gelangt (PubMed:32200799, PubMed:32296175). Verwandte Referenzen: PMID:32200799, PMID:32296175
• RIPK3 kann die virale Replikation auch durch vom Zelltod unabhängige Mechanismen einschränken, wie z. B. durch Hochregulierung von ACOD1/IRG1 und Itakonatproduktion, um Succinatdehydrogenase zu hemmen und die Replikation des viralen Genoms zu unterdrücken (PubMed:30635240). Verwandte Referenzen: PMID:30635240
• RIPK3 ist überwiegend zytosolisch, kann sich aber auch im Zellkern lokalisieren, und wird in embryonalen und adulten Geweben einschließlich Milz, Leber, Hoden, Herz, Gehirn und Lunge exprimiert.
• Das Protein wird durch Phosphorylierung, Methylierung und ubiquitinähnliche Konjugation reguliert und kann den Zellstoffwechsel auch durch Interaktion mit Stoffwechselenzymen wie GLUL, GLUD1 und PYGL beeinflussen, um den Zitronensäurezyklus und die oxidative Phosphorylierung zu stimulieren, was potenziell die ROS-Produktion erhöht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 320–420 innerhalb der Kinasedomäne von Maus-RIP3, was darauf hindeutet, dass der Antikörper Epitope in diesem funktionalen Bereich erkennen könnte.
• Für den Western Blot liegt das beobachtete Molekulargewicht von RIP3 bei ~63 kDa; erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver Kontrollen wie Lysaten aus Mausmilz oder -leber.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie lokalisiert sich RIP3 im Zytoplasma und Zellkern; fügen Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte hinzu.
• Im ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von rekombinantem oder endogenem RIP3 verwendet werden; eine Optimierung der Beschichtungs- und Nachweisbedingungen wird empfohlen.
• Die Kreuzreaktivität wurde bei der Maus validiert; eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies ist nicht garantiert und sollte experimentell überprüft werden.

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