Anti-RING1B/RNF2 Rabbit PolymAb® Monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA - Q99496

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RING1B/RNF2

• Katalysiert die Monoubiquitinierung von Histon H2A an Lysin-119 (H2AK119Ub), eine entscheidende epigenetische Markierung für die Polycomb-vermittelte transkriptionelle Repression. Verwandte Referenzen: PMID:15386022, PMID:16359901, PMID:21772249
• Kernkomponente der Polycomb-Repressionskomplexes 1 (PRC1), essenziell für die Aufrechterhaltung des stillgelegten Zustands von Hox-Genen und anderen Entwicklungsregulatoren. Verwandte Referenzen: PMID:16359901, PMID:26151332
• Funktioniert als wichtigste E3-Ubiquitin-Ligase für H2A im PRC1-Komplex; seine Aktivität wird durch das Accessoireprotein RING1 moduliert.
• Die E3-Ligaseaktivität wird durch die PRC1-Untereinheit BMI1/PCGF4 deutlich gesteigert. Verwandte Referenzen: PMID:21772249
• Beteiligt an der X-Chromosom-Inaktivierung, beteiligt an der Initiierung sowohl der geprägten als auch der zufälligen Inaktivierung bei weiblichen Säugetieren.
• Zeigt eine zellzyklusabhängige Assoziation mit Chromatin; in ruhenden B- und T-Lymphozyten hemmt die Interaktion mit AURKB seine Aktivität, um die Basaltranskription aufrechtzuerhalten.
• Wirkt als negativer Regulator der Autophagie, indem es die Ubiquitinierung und anschließende Degradation von AMBRA1 vermittelt.
• Lokalisiert im Kern, im Zytoplasma und auf Chromosomen; unterliegt posttranslationaler Azetylierung und Phosphorylierung und verfügt über eine RING-Typ-Zinkfingerdomäne.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für das Western Blotting bereiten Sie Ganzzell- oder Kernextrakte unter reduzierenden Bedingungen zu und erwarten Sie eine Bande bei ca. 38 kDa. Verwenden Sie geeignete positive und negative Kontrolllysate, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollten Antigen-Retrieval-Bedingungen und Antikörperkonzentration für jeden Gewebetyp optimiert werden. Erwägen Sie die Verwendung eines biotinfreien Nachweissystems, um den Hintergrund zu minimieren.
• Für die Immunpräzipitation werden milde Lysepuffer empfohlen, die Protein-Protein-Interaktionen erhalten. Validieren Sie co-immunpräzipitierte Partner per Western Blot.
• Im ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz verwendet werden; führen Sie Schachbretttitrationen durch, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.
• Aufgrund der hohen Konservierung ist eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben zu erwarten, die aber in Ihrem spezifischen Experimentalsystem validiert werden sollte.

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