Monoklonaler Anti-RING1B/RNF2-Antikörper für WB, IP und ELISA - Q99496

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RING1B/RNF2-Funktion und Lokalisierung

• RING1B/RNF2, auch bekannt als RING2, RING1b oder BAP-1, ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die die Monoubiquitinierung von Histon H2A an Lys-119 (H2AK119Ub) katalysiert, eine Schlüsselmodifikation für die epigenetische transkriptionelle Repression und die X-Chromosomen-Inaktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:15386022 PMID:16359901 PMID:21772249
• Es ist eine essentielle Komponente des Polycomb-repressiven Komplexes 1 (PRC1), der den stillgelegten Zustand von Entwicklungsgenen, einschließlich Hox-Clustern, durch Chromatinmodifikation aufrechterhält. Verwandte Referenzen: PMID:16359901 PMID:26151332
• Die E3-Ligase-Aktivität von RING1B/RNF2 wird durch die PRC1-Untereinheit BMI1/PCGF4 verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:21772249
• RNF2 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert, kann aber auch im Zytoplasma und in Verbindung mit Chromosomen gefunden werden, was seine dynamische Rolle bei der Chromatinregulation widerspiegelt.
• Das Protein enthält eine RING-Typ-Zinkfinger-Domäne und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Funktion modulieren können.
• RING1B/RNF2 wurde mit einer zellzyklusabhängigen chromosomalen Assoziation in Verbindung gebracht und wird in ruhenden Lymphozyten durch AURKB negativ reguliert, um die Transkription aufrechtzuerhalten.
• Zusätzlich wirkt es als negativer Regulator der Autophagie, indem es AMBRA1 ubiquitiniert und für den Abbau markiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid innerhalb der Aminosäuren 100–200 von humanem RING1B/RNF2; diese Region ist laut Strukturmodellen voraussichtlich oberflächenzugänglich und sollte Antikörper hervorbringen, die native Proteinkonformationen in der Immunpräzipitation (IP) und im ELISA erkennen.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~38 kDa; ziehen Sie die Verwendung geeigneter Proteinleiter-Marker in Betracht und überprüfen Sie die Bandspezifität in relevanten Human-, Maus- und Rattenzelllysaten.
• Bei IP-Experimenten können das Vorreinigen von Lysaten und die Optimierung des Antikörper-Protein-Verhältnisses helfen, den Hintergrund zu minimieren; die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenorthologen ermöglicht vergleichende Studien.
• Für den ELISA titrieren Sie den Antikörper mit rekombinantem Protein oder Peptidstandards, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen; beachten Sie, dass es sich um einen monoklonalen Antikörper handelt, der eine hohe Spezifität aufweisen kann.

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