Anti-Rig-I/DDX58-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – O95786

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Rig-I/DDX58

• RIG-I ist ein zytoplasmatischer Rezeptor der angeborenen Immunität, der virale doppelsträngige RNA und 5'-triphosphorylierte einzelsträngige RNA erkennt und dadurch eine Signalkaskade auslöst, die zur Produktion von Typ-I-Interferon und proinflammatorischen Zytokinen führt. Zugehörige Referenzen: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:16125763
• Nach der RNA-Bindung oligomerisiert RIG-I zu Filamenten und rekrutiert die E3-Ubiquitin-Ligase RNF135, die die antivirale Signalübertragung durch ubiquitinierungsabhängige und -unabhängige Mechanismen aktiviert und verstärkt. Zugehörige Referenzen: PMID:28469175, PMID:31006531
• RIG-I erkennt ein breites Spektrum an RNA-Viren, darunter Influenza-, Masern-, Hepatitis-C-, Dengue- und West-Nil-Viren sowie SARS-CoV-2; außerdem erkennt es einige DNA-Viren wie das Epstein-Barr-Virus über von der RNA-Polymerase III transkribierte RNAs. Zugehörige Referenzen: PMID:21616437, PMID:21884169, PMID:19631370
• Die Ligandenspezifität erfordert eine 5'-Triphosphatgruppe und eine Basenpaarung mit stumpfem Ende am 5'-Ende; 5'-Überhänge heben die Aktivität auf, während 3'-Überhänge nur geringe Auswirkungen haben. Zugehörige Referenzen: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:19576794
• Neben der Erkennung von Viren kann RIG-I an der Granulozytendifferenzierung, der Phagozytose von Bakterien und der Zellmigration beteiligt sein.
• RIG-I ist überwiegend im Zytoplasma lokalisiert, assoziiert jedoch auch mit Zellfortsätzen, dem Zytoskelett und Tight Junctions; es wird in glatten Gefäßmuskelzellen exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Beim Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 107 kDa. Verwenden Sie geeignete Proteinmarker und berücksichtigen Sie Beladungskontrollen, um die Bandgröße zu bestätigen.
• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 241–455 und umfasst die zentrale Helikase-Domäne. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert, was mit der angegebenen Kreuzreaktivität übereinstimmt; eine Validierung in den Zielarten wird dennoch empfohlen.
• Für ELISA sollte ein Detektionsantikörper verwendet werden, der auf ein nicht überlappendes Epitop abzielt, um eine Konkurrenz zu vermeiden. Optimieren Sie die Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen für ein bestmögliches Signal-Rausch-Verhältnis.

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