Anti-RHOH Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q15669

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: RHOH-Funktion und Lokalisierung

• RHOH (Rho-verwandtes GTP-bindendes Protein RhoH), auch bekannt als TTF (Translocation three four protein), gehört zur Rho-GTPase-Familie, ist aber atypisch: es bindet GTP, besitzt jedoch keine intrinsische GTPase-Aktivität und ist resistent gegen RhoGAPs.
• Es fungiert als kritischer negativer Regulator der Proliferation, des Überlebens und der Migration hämatopoetischer Vorläuferzellen; essentiell für die Thymozytenentwicklung und TCR-Signalgebung durch Vermittlung der ZAP70-Rekrutierung und -Aktivierung.
• Erforderlich für die CD3Z-Phosphorylierung, die ZAP70-Membrantranslokation und die Aktivierung des nachgeschalteten LAT-Signalosoms während der prä-TCR- und TCR-Signalgebung, um eine effiziente Beta-Selektion und positive Selektion sicherzustellen.
• Spielt eine Schlüsselrolle in der Mastzellfunktion, indem es die SYK-Phosphorylierung in der FcεRI-vermittelten Signaltransduktion erleichtert und die Calcium-Mobilisierung ermöglicht.
• Hemmt die NF-κB- und CRK/p38-Aktivierung durch TNF und reguliert die Leukotrienproduktion in Neutrophilen negativ.
• Subzelluläre Lokalisierung: überwiegend zytoplasmatisch und mit der Zellmembran assoziiert.
• Gewebespezifität: Expression beschränkt auf hämatopoetische Zellen (höchste im Thymus, niedriger in Milz/Knochenmark); angereichert in TH1-T-Helferzellen; in Neutrophilen unter entzündlichen Bedingungen hochreguliert (z.B. Mukoviszidose, Kolitis).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das humanes RHOH in voller Länge (Aminosäuren 1-191), wodurch dieser polyklonale Antikörper für den Nachweis mehrerer Epitope geeignet ist; optimale Verdünnung und Bedingungen sollten für jede Anwendung empirisch bestimmt werden.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~21 kDa; verwenden Sie ein 12–15%iges SDS-PAGE-Gel und validieren Sie mit hämatopoetischen Zelllinien (z.B. Jurkat, THP-1), von denen bekannt ist, dass sie RHOH exprimieren.
• Für Immunfluoreszenz/ICC ist eine Permeabilisierung für die zytoplasmatische/Membranfärbung erforderlich; führen Sie angesichts der eingeschränkten hämatopoetischen Expression geeignete Kontrollen durch.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus ist beschrieben; dieser Antikörper kann in Mausmodellen verwendet werden, jedoch wird eine Validierung in der relevanten Spezies und im relevanten Gewebe empfohlen.
• ELISA-Anwendungen können unter Verwendung von rekombinantem Protein als Standard untersucht werden; optimieren Sie Beschichtungs- und Nachweisbedingungen.

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