Anti-RhoB-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB und ELISA – P62745

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von RhoB

• RhoB ist ein kleines GTP-bindendes Protein der Rho-Familie, das zwischen GDP-gebundenen inaktiven und GTP-gebundenen aktiven Zuständen wechselt, um nachgeschaltete Signalwege zu regulieren.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Vermittlung der Apoptose in neoplastisch transformierten Zellen nach DNA-Schädigung und ist für den durch genotoxischen Stress induzierten Zelltod in Brustkrebszellen wesentlich.
• RhoB wirkt als Tumorsuppressor; seine genetische Deletion führt zur spontanen Tumorbildung und unterstreicht damit seine negative regulatorische Rolle bei der Tumorigenese.
• Es ist am intrazellulären Proteintransport beteiligt, indem es PKN1 auf Endosomen ausrichtet, den EGF-Rezeptor von späten Endosomen zu Lysosomen leitet und AKT1 stabilisiert, um das Überleben von Endothelzellen zu fördern.
• Während der Zytokinese fungiert RhoB als mikrotubuliabhängiges Signal, das für die Bildung des kontraktilen Myosinrings erforderlich ist.
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich RhoB an den Membranen später Endosomen, an der Zellmembran, im Zellkern und in der Teilungsfurche, was mit seinen vielfältigen Funktionen übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Prenylierung und Palmitoylierung, sind entscheidend für seine Membranassoziation und funktionelle Lokalisierung.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Beim Western Blot ist für RhoB eine Bande bei etwa 22 kDa zu erwarten. Optimieren Sie die Lysatvorbereitung und die Blockierungsbedingungen, um den Hintergrund zu minimieren.
• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der internen Region (Aminosäuren 70–150), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich Gesamt-RhoB erkennt. Für Untersuchungen, die Isoformspezifität erfordern, sollte die Validierung mit geeigneten Kontrollen erfolgen.
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet; für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA kann die Kombination mit einem Detektionsantikörper in Betracht gezogen werden.
• Eine Kreuzreaktivität gegenüber Mensch, Maus und Ratte ist angegeben. Bei der Verwendung in anderen Spezies sollten die Sequenzhomologie überprüft und ein Pilotversuch durchgeführt werden.
• Als monoklonaler Kaninchenantikörper bietet er eine hohe Chargenkonsistenz. Für kritische Experimente sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.

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