Anti-RGAP1 Kaninchen monoklonaler Antikörper (KD-validiert) für WB, IHC-P, ELISA – Q9H0H5

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RGAP1

• RGAP1, auch bekannt als Rac GTPase-aktivierendes Protein 1, MgcRacGAP oder CYK4, ist eine 71 kDa große Komponente des Centralspindlin-Komplexes, ein mikrotubuli-abhängiges und Rho-vermitteltes Signalmodul, das die Bildung der kontraktilen Ringstruktur während der Zytokinese koordiniert. Es bindet sequenziell ECT2 und RAB11FIP3, um das Einwachsen der Spaltfurche und die Abszission zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:18511905
• Über seine GAP-Aktivität hinaus kontrolliert RGAP1 Wachstum und Differenzierung hämatopoetischer Zellen durch Mechanismen, die unabhängig von der Rac-GTPase-Regulation sind. Verwandte Referenzen: PMID:10979956
• RGAP1 spielt eine entscheidende Rolle bei der Erythropoese, Mutationen im RACGAP1-Gen sind mit der kongenitalen dyserythropoetischen Anämie Typ IIIB (CDAN3B) assoziiert. Verwandte Referenzen: PMID:34818416
• RGAP1 lokalisiert sich dynamisch im Zellkern, Zytoplasma, Spindelapparat, Spaltfurche, Midbody, Midbody-Ring und an der Zellmembran, was seine vielseitigen Funktionen während der Zellteilung widerspiegelt.
• Hohe Expression in Hoden, Thymus und Plazenta, mit niedrigeren Gehalten in Milz und peripheren Blutlymphozyten. In den Hoden ist die Expression auf Keimzellen beschränkt und erreicht ihren Höhepunkt in Spermatozyten. Die Expression ist zellzyklusabhängig und erreicht ihren Höhepunkt in der G2/M-Phase.
• RGAP1 weist eine starke GAP-Aktivität gegenüber CDC42 und RAC1 und eine schwächere Aktivität gegenüber RHOA auf. Es kann außerdem am Sulfattransport in männlichen Keimzellen, an der Spermatogenese und der neuronalen Proliferation beteiligt sein.
• Das Protein enthält eine Zinkfinger- und eine Coiled-Coil-Domäne und unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, was auf eine komplexe Regulation hinweist.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid gerichtet, das die Aminosäuren 533–632 umfasst; diese Region kann sowohl in nativen als auch in denaturierten Konformationen zugänglich sein, was Anwendungen wie WB und IHC-P unterstützt. Validieren Sie in dem relevanten Probenystem.
• Für den Western Blot empfehlen sich Lysate von Zelllinien mit mäßiger bis hoher RGAP1-Expression (z. B. HeLa, Jurkat) oder Hodengewebe. Die RGAP1-Expression erreicht ihren Höhepunkt in der G2/M-Phase; eine Synchronisation kann das Signal verstärken.
• Für IHC-P überprüfen Sie die Färbung in formalinfixierten, paraffineingebetteten Schnitten von Hoden, Thymus oder Plazenta, wo RGAP1 reichlich exprimiert wird. Antigengewinnungsbedingungen müssen gegebenenfalls optimiert werden.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-RGAP1; validieren Sie die spezies-spezifische Reaktivität mit geeigneten Gewebe- oder Zellkontrollen.
• ELISA kann unter Verwendung des Immunogenpeptids als Positivkontrolle durchgeführt werden; Antikörpertiter und Bindungsaffinität sollten empirisch bestimmt werden.

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