Anti-RGAP1 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9H0H5

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RGAP1-Funktion und -Lokalisierung

• RGAP1 (Rac GTPase-activating protein 1), auch bekannt als CYK4, MgcRacGAP oder HsCYK-4, wird vom RACGAP1-Gen kodiert und fungiert primär als GTPase-aktivierendes Protein für Rho-Familien-GTPasen.
• Es ist eine Kernkomponente des Centralspindlin-Komplexes, einem mikrotubuliabhängigen und Rho-vermittelten Signalkomplex, der für die Bildung des myosinabhängigen Kontraktionsrings während der Zytokinese essentiell ist. Es bindet nacheinander an ECT2 und RAB11FIP3, um das Einschnüren der Furche (Ingression) und die Abschnürung (Abscission) zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:18511905
• Über seine strukturelle Rolle hinaus steuert RGAP1 das Zellwachstum und die Differenzierung hämatopoetischer Zellen durch Mechanismen, die unabhängig von der Rac-GTPase-Aktivität sind (PubMed:10979956). Es ist auch entscheidend für die Erythropoese (PubMed:34818416). Verwandte Referenzen: PMID:10979956 PMID:34818416
• Das Protein zeigt eine starke GTPase-Aktivierung gegenüber CDC42 und RAC1 und eine schwächere Aktivität gegen RHOA, was auf eine Beteiligung bei der Remodellierung des Aktin-Zytoskeletts und der Zellpolarität hindeutet.
• Subzellulär lokalisiert sich RGAP1 dynamisch im Zellkern, Zytoplasma, Spindel, Mittelkörper und der Einschnürfurche während der Zellteilung; es wird auch im Akrosom männlicher Keimzellen gefunden.
• Die Expression ist am höchsten in Hoden, Thymus und Plazenta, zellzyklusreguliert mit Spitzenwerten in der G2/M-Phase und kann zur Spermatogenese und neuronalen Entwicklung beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein N-terminales Peptid (Aa 1–100) von menschlichem RGAP1. Aufgrund der hohen Sequenzkonservierung sollte die Kreuzreaktivität mit nicht-menschlichen Spezies in der relevanten Probenmatrix validiert werden.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~71 kDa. Erwägen Sie die Synchronisation von Kulturzellen in der G2/M-Phase, um RGAP1 anzureichern, da die Expression während der Mitose ihren Höhepunkt erreicht.
• Bei ELISA-Anwendungen prüfen Sie, ob das Beschichtungsantigen oder das Nachweisformat nicht sterisch mit dem Peptid-Epitop konkurriert, das von diesem monoklonalen Antikörper erkannt wird.
• Da sich RGAP1 in mehreren subzellulären Kompartimenten (Kern, Zytoplasma, Mittelkörper) aufhält, können Zellfraktionierung oder spezifische Lysepuffer die Signaldetektion im WB verbessern.

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