Anti-RFC1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC und ELISA - P35251

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RFC1

• RFC1 codiert die große Untereinheit (140 kDa) des heteropentameren Replikationsfaktor C (RFC)-Komplexes, auch bekannt als Aktivator 1.
• Der RFC-Komplex wird für die Elongation von primierten DNA-Matrizen durch die DNA-Polymerasen Delta und Epsilon benötigt und lädt PCNA auf eine ATP-abhängige Weise auf die DNA auf (PubMed:9488738).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:9488738
• Diese Untereinheit bindet spezifisch die Primer-Template-Verbindung und kann sowohl mit einzel- als auch doppelsträngiger DNA sowie mit GA-reichen Sequenzen einschließlich des PO-B-Transkriptionselements interagieren, was auf eine doppelte Rolle bei der DNA-Replikation und Transkriptionsregulation hindeutet.
• RFC1 ist im Zellkern lokalisiert und wird in allen menschlichen Geweben außer der Plazenta weit verbreitet exprimiert.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung), wie durch großangelegte proteomische Studien gezeigt wurde.
• Mutationen in RFC1 sind mit dem Kleinhirnataxie-Neuropathie-Vestibular-Areflexie-Syndrom (CANVAS) assoziiert, was seine klinische Relevanz über den Kernbereich des DNA-Stoffwechsels hinaus erweitert.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Transkriptvarianten, die zur funktionellen Diversität beitragen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Western Blot erwarten Sie eine Bande um 128 kDa. Verwenden Sie 6-8 % SDS-PAGE für eine optimale Trennung von hochmolekularen Proteinen.
• Für Immunfluoreszenz/ICC fügen Sie eine nukleare Gegenfärbung (z. B. DAPI) hinzu und bestätigen Sie die nukleare Lokalisation. Permeabilisierungsbedingungen müssen ggf. optimiert werden.
• ELISA: Der Antikörper kann zum Nachweis von rekombinantem oder endogenem RFC1 verwendet werden; titrieren Sie ihn angemessen.
• Sequenzalignment des Immunogens (AS 400-700) bei Mensch, Maus und Ratte zeigt hohe Konservierung, was die berichtete Kreuzreaktivität stützt; validieren Sie dennoch in Ihrem spezifischen Versuchsaufbau.

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