Anti-Rev-Erbα/NR1D1 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P20393

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Rev-Erbα/NR1D1 Funktion und Lokalisation

• Rev-Erbα (NR1D1) ist ein Häm-bindender nukleärer Rezeptor, der als transkriptioneller Repressor fungiert und einen kritischen negativen Arm der zirkadianen Uhr bildet, indem er direkt Kerntaktgebergene wie BMAL1, CLOCK und CRY1 reprimiert.
• Es reguliert vielfältige Stoffwechselwege, einschließlich Lipid- und Gallensäurestoffwechsel, Adipogenese, Glukoneogenese und Entzündungsreaktionen, auf hämabhängige Weise durch Rekrutierung des NCOR1/HDAC3-Korepressorkomplexes.
• Das Protein bindet als Monomer an RevRE-Elemente (Konsensus 5'-[A/G]GGTCA-3' mit einer A/T-reichen 5'-Sequenz) oder als Homodimer an RevDR-2-Elemente (direkte Wiederholungen im Abstand von zwei Nukleotiden).
• Rev-Erbα konkurriert mit RORα um DNA-Bindung und reprimiert PPARGC1A, wodurch die Hämsynthese und die rhythmische Expression von Stoffwechselenzymen kontrolliert werden.
• Subzellulär ist NR1D1 hauptsächlich nukleär lokalisiert, findet sich aber auch im Zytoplasma und in dendritischen Dornen, was mit seiner Rolle bei neuronalen Funktionen übereinstimmt.
• Weit verbreitet exprimiert mit hohen Konzentrationen in Leber, Fettgewebe, Skelettmuskel, Gehirn und Makrophagen; die Expression oszilliert täglich im suprachiasmatischen Nukleus und peripheren Geweben.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität und Aktivität modulieren; Ubiquitin-vermittelter Abbau löst die entzündungsbezogene Repression bei Auslösern.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 280–360 innerhalb der Ligandenbindungsdomäne; diese Region kann die Spezifität für die Konformation des Rezeptors und hämabhängige Wechselwirkungen verleihen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 67 kDa; überprüfen Sie die Bandengröße in relevanten Proben, da die endogene Expression je nach zirkadianer Zeit und Gewebetyp variieren kann.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist eine vorwiegend nukleäre Färbung zu erwarten; in neuronalen Zellen kann jedoch auch eine zytoplasmatische und dendritische Lokalisation beobachtet werden, daher sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie ein Detektionssystem in Betracht ziehen, das die Kaninchen-IgG-Fc-Region erkennt, wenn dieser Primärantikörper in einem indirekten Format verwendet wird.
• Bei der Arbeit mit Rev-Erbα ist zu beachten, dass seine Expression und Aktivität rhythmisch reguliert sind; entnehmen Sie Proben zu konsistenten zirkadianen Zeitpunkten, um die Reproduzierbarkeit zu gewährleisten.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte und kann daher für vergleichende Studien zwischen Arten verwendet werden; validieren Sie ihn in der gewünschten Spezies durch geeignete Kontrollen.

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