Anti-Rev-erb beta/NR1D2 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q14995

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Rev-erb beta/NR1D2 Funktion und Lokalisierung

• Rev-erb beta, kodiert durch das NR1D2-Gen, ist ein Mitglied der nukleären Rezeptor-Unterfamilie 1 Gruppe D. Es fungiert als Häm-abhängiger transkriptioneller Repressor und Aktivator, der zirkadiane und Stoffwechselwege integriert.
• Als Kernkomponente der zirkadianen Uhr unterdrückt Rev-erb beta direkt die Expression von BMAL1 und CLOCK und bildet eine kritische negative Rückkopplungsschleife, die den 24-Stunden-Rhythmus aufrechterhält.
• Das Protein bindet als Monomer oder Homodimer an zwei Klassen von DNA-Antwort-Elementen (RevRE und RevDR-2), was einen Wettbewerb mit ROR alpha (RORA) und die Regulation von Genen, die am Lipidstoffwechsel und Entzündungen beteiligt sind, ermöglicht.
• Rev-erb beta wirkt als Rezeptor für Häm, das die Interaktion mit dem NCOR1/HDAC3-Korepressor-Komplex stimuliert, um die transkriptionelle Repression von Zielgenen zu verstärken.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist primär nukleär, wurde aber auch im Zytoplasma nachgewiesen, was ein dynamisches Shuttling widerspiegelt, das mit seinen regulatorischen Funktionen verbunden ist.
• Wird weit verbreitet mit hohen Werten in Leber, Fettgewebe, Skelettmuskel und Gehirn exprimiert; seine Expression oszilliert täglich im suprachiasmatischen Nucleus (SCN) und in peripheren Geweben.
• Zu den wichtigsten posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität modulieren, und es enthält Zinkfinger-Motive, die für die DNA-Bindung entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 220-300 in der Ligandenbindungsdomäne, was darauf hindeutet, dass der Antikörper natives Rev-erb beta erkennt; bestätigen Sie die Spezifität durch Verwendung positiver und negativer Lysate in WB.
• Bei WB ist ein Band bei etwa 65 kDa zu erwarten. Aufgrund möglicher posttranslationaler Modifikationen kann es zu einer geringfügigen Verschiebung des scheinbaren Molekulargewichts kommen; validieren Sie dies in Ihrem spezifischen Proben-System.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte macht diesen Antikörper geeignet für vergleichende Studien; überprüfen Sie die Reaktivität in Ihren Modellen, da die Expressionsniveaus variieren können.
• Für ELISA optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnungen; das rekombinante Immunogen kann als positive Kontrolle dienen, um die Assay-Empfindlichkeit festzulegen.
• Angesichts der zirkadianen Oszillation von Rev-erb beta sollten Sie in Betracht ziehen, Proben zu mehreren Zeitpunkten zu entnehmen, um zeitliche Veränderungen der Zielhäufigkeit zu erfassen.

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