Anti-REST/NRSF Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13127

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: REST/NRSF-Funktion und -Lokalisierung

• Fungiert als transkriptioneller Repressor, der an das neuronale Restriktions-Silencer-Element (NRSE) bindet und die Corepressoren SIN3A und RCOR1 rekrutiert, was zur Rekrutierung von Histondeacetylasen und zur Stilllegung neuronaler Gene in nicht-neuronalen Zellen führt. Verwandte Referenzen: PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093

• Vermittelt die Chromatinmodifikation durch den BHC-Komplex, der Histone an RE1/NRSE-Stellen deacetyliert und demethyliert, um die Genstilllegung durchzusetzen.

• Unterdrückt die Transkription durch CDYL-abhängige Rekrutierung der Histone-Methyltransferase EHMT2, ein Mechanismus, der die zelluläre Transformation unterdrücken kann. Verwandte Referenzen: PMID:19061646

• Die Repressoraktivität wird durch Heterodimerisierung mit dem alternativ gespleißten Isoform 3 antagonisiert, was die NRSE-Bindung verhindert und die Zielgene dereprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:11779185

• Erhält den ruhenden Zustand adulter neuraler Stammzellen durch Unterdrückung neuronaler Gene; eine Dissoziation vom NRSE bei Differenzierungssignalen ermöglicht die Neuronenspezifizierung. Verwandte Referenzen: PMID:21258371

• Wirkt als Schlüsselrepressor der Genexpression unter hypoxischen Bedingungen und trägt zur Stressresistenz und Regulation des Zelltods im alternden Gehirn bei. Verwandte Referenzen: PMID:27531581, PMID:24670762

• Gewebeexpression: nachgewiesen in Neuronen des präfrontalen Kortex, des Hippocampus und des Kleinhirns; die Kernspiegel sind bei Alzheimer-Krankheit und Parkinson-Krankheit reduziert, mit pathologischer Aggregation in Lewy-Körpern in dopaminergen Neuronen. Verwandte Referenzen: PMID:24670762, PMID:30684677

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 25–130 von humanem REST, einer N-terminalen Region N-terminal zu den Zinkfingerdomänen. Benutzer sollten überprüfen, ob ihr experimentelles System dieses Epitop erhält.
• Für Western Blots starten Sie mit einer Verdünnung von 1:500–1:2000 und validieren unter Verwendung von Lysaten aus nicht-neuronalen REST-exprimierenden Zelllinien (z. B. HeLa) zusammen mit geeigneten Kontrollen.
• Für ELISA kann rekombinantes REST-Protein oder ein Peptid, das die Immunogenregion überbrückt, als Positivkontrolle dienen, um die Antikörperbindung zu bewerten.
• Obwohl eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte berichtet wird, wird eine Sequenzalignment über Spezies hinweg in der Immunogenregion empfohlen, um die erwartete Reaktivität zu bestätigen.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts (~122 kDa) sollten Sie sicherstellen, dass die Gelelektrophorese-Bedingungen für hochmolekulare Proteine optimiert sind, und verlängerte Transferzeiten beim WB in Betracht ziehen.

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