Anti-REST/NRSF Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für IF/ICC, ELISA - Q13127

Kernproduktscheifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: REST/NRSF-Funktion und -Lokalisierung

• REST/NRSF, auch bekannt als RE1-silencing transcription factor oder neural-restrictive silencer factor, ist ein transkriptioneller Repressor, der an neuron-restrictive silencer elements (NRSE) bindet, um neuronale Gene in nicht-neuronalen Zellen zum Schweigen zu bringen. Er rekrutiert die Corepressoren SIN3A und RCOR1, die wiederum Histondeacetylasen anziehen, um das Chromatin zu modifizieren und die Repression durchzusetzen. Verwandte Referenzen: PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093
• REST rekrutiert den BHC-Komplex für Histondeacetylierung und -demethylierung und kann einen repressiven Komplex mit CDYL und der Histone-Methyltransferase EHMT2 bilden, was an der Unterdrückung der Transformation beteiligt ist. Verwandte Referenzen: PMID:19061646
• Isoform 3 (eine kürzere Spleißvariante) zeigt eine schwächere Repressoraktivität und kann Heterodimere mit vollständigen REST bilden, wodurch dessen DNA-Bindung und Corepressor-Rekrutierung gehemmt werden, was zur Dereprimierung der Zielgene führt. Dieses Isoform-Switching ist entscheidend für das Hören und die Aktivierung neuronaler Gene. Verwandte Referenzen: PMID:11779185, PMID:11741002
• REST erhält den ruhenden Zustand adulter neuraler Stammzellen aufrecht, indem er neuronale Gene reprimiert; seine Dissoziation von NRSE-Stellen ermöglicht die Differenzierung zu reifen Neuronen. Verwandte Referenzen: PMID:21258371
• Während der postnatalen Entwicklung reprimiert REST die GRIN2B-Expression und erleichtert damit einen Wechsel in der Zusammensetzung der synaptischen NMDA-Rezeptor-Untereinheiten von GRIN2B zu GRIN2A (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• Unter hypoxischen Bedingungen wirkt REST als Schlüsselrepressor durch direkte Bindung an RE1/NRSE-Stellen in den Promotoren von sauerstoffempfindlichen Genen. Verwandte Referenzen: PMID:27531581
• REST kann Stressresistenz im alternden Gehirn verleihen, indem er Gene reguliert, die am Zelltod und an Stressreaktionen beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:24670762
• Bei Brustkrebs reguliert REST die Expression von SRRM3 negativ, und der Verlust von REST korreliert mit erhöhter Invasivität. Verwandte Referenzen: PMID:26053433
• REST ist ubiquitär exprimiert, mit höheren Spiegeln in lymphoiden Geweben; in Neuronen des präfrontalen Kortex und des Hippocampus nimmt nukleäres REST bei Alzheimer-Krankheit, frontotemporaler Demenz und Parkinson-Krankheit ab, oft mit einer Fehllokalisierung zu Lewy-Körpern. Verwandte Referenzen: PMID:24670762, PMID:30684677, PMID:21258371, PMID:26053433, PMID:8568247
• REST lokalisiert sowohl im Kern als auch im Zytoplasma, enthält neun C2H2-Typ-Zinkfinger-Motive und wird durch Phosphorylierung und Ubiquitinierung reguliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Reste 760–1060) liegt innerhalb der C-terminalen Region des vollständigen REST (Isoform 1). Es wird erwartet, dass dieser Antikörper Isoform 1 erkennt; die kürzere Isoform 3 wird möglicherweise nicht erkannt. Validieren Sie die Reaktivität im entsprechenden Probenystem.
• Für IF/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen. Die Kernfärbung sollte überwiegen, aber unter bestimmten Bedingungen kann ein zytoplasmatisches Signal beobachtet werden.
• Wählen Sie geeignete Zellmodelle: nicht-neuronale Linien (z. B. HEK293, HeLa) exprimieren REST, während reife Neuronen typischerweise eine niedrige oder keine Expression zeigen. Verwenden Sie siRNA-Knockdown oder Peptid-Blockierung, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA kann die Immunogensequenz oder vollständiges rekombinantes REST als Standard oder blockierendes Peptid dienen. Berücksichtigen Sie sowohl direkte als auch indirekte Testformate.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, überprüfen Sie die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz beim Wechsel zwischen Chargen für kritische Experimente.

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