Anti-RCC1 Kaninchen-Monoklonal-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P18754

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RCC1-Funktion und -Lokalisierung

• RCC1 wirkt als Guanin-Nukleotid-Freisetzungsfaktor (GEF) für die kleine GTPase Ran und katalysiert den Austausch von GDP gegen GTP, um die Aktivität von Ran zu regulieren (PubMed:11336674, PubMed:17435751, PubMed:1944575).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:11336674, PMID:17435751, PMID:1944575

• Indem RCC1 eine hohe Konzentration an GTP-gebundenem Ran im Zellkern aufrechterhält, erleichtert es die Freisetzung von Frachtproteinen aus Importinen nach dem Kernimport (PubMed:22215983).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22215983

• Während der Mitose generiert RCC1 chromosomengebundenes Ran-GTP, das für die ordnungsgemäße Assembly des mitotischen Spindels und den Fortschritt der Mitose essentiell ist (PubMed:12194828, PubMed:17435751, PubMed:22215983).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:12194828, PMID:17435751, PMID:22215983

• RCC1 bindet direkt an Nukleosomen und doppelsträngige DNA und verankert seine GEF-Aktivität an Chromatin (PubMed:17435751, PubMed:18762580).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:17435751, PMID:18762580

• Es reguliert den Beginn der Chromosomenkondensation während der S-Phase und sorgt für einen ordnungsgemäßen Zellzyklusfortschritt (PubMed:3678831).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:3678831

• Das Protein enthält sieben tandemartige RCC1-Wiederholungen, die eine siebenblättrige β-Propeller-Struktur bilden, und unterliegt alternatives Spleißen, um multiple Isoformen zu erzeugen.

• Posttranslationale Modifikationen von RCC1 umfassen Phosphorylierung und Methylierung, die seine Aktivität und Wechselwirkungen modulieren können.

• Subzellulär ist RCC1 vorwiegend im Zellkern lokalisiert, wo es mit Chromatin assoziiert, kann aber auch im Zytoplasma nachgewiesen werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von humanem RCC1 abdeckt; diese N-terminale Region ist hochkonserviert zwischen Mensch, Maus und Ratte, was die beobachtete Kreuzreaktivität erklären könnte.
• Für Western Blotting wird eine Bande erwartet, die dem vorhergesagten Molekulargewicht von ~45 kDa entspricht; bestätigen Sie die Spezifität mithilfe von Positivkontrollen wie HeLa- oder HEK293-Ganzzelllysaten.
• Bei der Immunhistochemie an Paraffinschnitten wird eine Antigen-Retrieval empfohlen, und eine Titration kann erforderlich sein, um das Signal aufgrund der chromatingebundenen Natur des Ziels zu optimieren.
• Für ELISA kann dasselbe Peptid-Immunogen als Beschichtungsstandard genutzt werden, oder rekombinantes RCC1-Protein kann für die Entwicklung quantitativer Assays verwendet werden.

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