Anti-RBCK1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9BYM8

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RBCK1

• RBCK1 (RanBP-Typ- und C3HC4-Typ-Zinkfinger enthaltendes Protein 1), auch bekannt als HOIL-1, RNF54 oder XAP4, ist eine E3-Ubiquitin-Ligase, die durch alternatives Spleißen multiple Isoformen bildet.
• Funktioniert als E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die Ubiquitin von UBE2L3/UBCM4 akzeptiert und es auf Substrate wie oxidiertes IREB2, TAB2 und IRF3 überträgt, wodurch der proteosomale Abbau gefördert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:12629548 PMID:17449468 PMID:18711448
• Bestandteil des LUBAC-Komplexes, der lineare (Met‑1-verknüpfte) Polyubiquitinketten an Substrate konjugiert und für die Aktivierung der kanonischen NF‑κB- und JNK-Signalwege essenziell ist. Zugehörige Referenzen: PMID:17006537 PMID:19136968 PMID:21455173
• LUBAC-vermittelte lineare Ubiquitinierung von IKBKG und RIPK1 stört den TNF-induzierten Zelltod und verhindert so übermäßige Entzündungen. Zugehörige Referenzen: PMID:17006537 PMID:21455173 PMID:21455180
• In der angeborenen Immunität bedeckt LUBAC zytosolische Bakterien mit linearen Ubiquitinketten, die als "Frisst-mich"-Signal für die Xenophagie dienen und die NF‑κB-Aktivierung fördern. Zugehörige Referenzen: PMID:28481331
• Gemeinsam mit OTULIN reguliert LUBAC den kanonischen Wnt-Signalweg während der Angiogenese. Zugehörige Referenzen: PMID:23708998
• Das Protein enthält RanBP‑Typ- und C3HC4‑Typ-Zinkfingerdomänen sowie eine Coiled-Coil-Region; es unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung.
• Als HBV-assoziierter Faktor identifiziert, interagiert RBCK1 mit dem Hepatitis-B-Virus-X-Protein und kann an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt sein.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 60–192 des humanen RBCK1, einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) erwarten Sie eine Bande bei etwa 58 kDa; verwenden Sie positives Kontrolllysat aus Zellen, die RBCK1 exprimieren (z. B. HeLa, HEK293T) und bestätigen Sie die Spezifität mit Knockdown-Kontrollen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) lokalisiert sich RBCK1 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern; optimieren Sie Fixierung und Permeabilisierung für die verwendete Zellart.
• Für den ELISA erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem RBCK1-Protein als Referenzstandard und validieren Sie die Assay-Bedingungen mit bekannten positiven und negativen Proben.

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