Anti-RB Kaninchen mAb für WB, IP, IHC-P, ELISA - P06400

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von RB

• Das Retinoblastom-assoziierte Protein (RB1) ist ein Tumorsuppressor, der vom RB1-Gen kodiert wird, auch bekannt als pRb, pp110, p105-Rb oder p110-RB1. Die kanonische Isoform hat ein Molekulargewicht von etwa 106 kDa.
• RB1 ist ein zentraler Regulator des G1/S-Zellzyklusübergangs: hypophosphoryliertes RB1 bindet und reprimiert E2F-Transkriptionsfaktoren und blockiert die Expression von Genen, die für den Eintritt in die S-Phase benötigt werden. Die Cyclin/CDK-abhängige Phosphorylierung setzt E2F frei und löst den Zellzyklusfortschritt aus. RB1 fördert zudem den G0–G1-Übergang durch CDK3/Cyclin-C-vermittelte Phosphorylierung. Verwandte Referenzen: PMID:10499802 PMID:15084261
• RB1 erhält die gesamte Chromatinstruktur aufrecht und trägt zur Heterochromatinbildung bei, indem es Histonmethyltransferasen (SUV39H1, KMT5B, KMT5C) rekrutiert und die Trimethylierung von H4 Lys-20 steuert.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend im Kern; allerdings kann RB1 auch zum Zytoplasma wandern, wo es während spezifischer Zellzyklusphasen oder apoptotischer Signalgebung mit verschiedenen Faktoren interagiert.
• Während viraler Infektion binden Onkoproteine von DNA-Tumorviren (z. B. SV40 großes T-Antigen, HPV E7, Adenovirus E1A) an RB1 und stören den RB1-E2F-Repressorkomplex, was zu unkontrollierter Zellproliferation führt.
• RB1 wird in der Netzhaut und in Vorhautkeratinozyten exprimiert, was mit seinen gewebespezifischen tumorsuppressiven Funktionen übereinstimmt. Verwandte Referenzen: PMID:20940255
• Das Protein unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Methylierung, die seine Aktivität und Interaktionen feinabstimmen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen die C-terminale Region (Aminosäuren 701–928) des menschlichen RB1 entworfen; diese Region deckt einen Teil der Taschendomäne und die C-terminale Domäne ab, die für Proteininteraktionen kritisch sind.
• Für den Western Blot (WB) ist eine Bande von etwa 106 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Zugabe von Phosphataseinhibitoren zu Lysepuffern, um den endogenen Phosphorylierungszustand zu erhalten.
• Der Antikörper wurde in IP, IHC-P und ELISA getestet; jede Anwendung kann eine unterschiedliche Probenvorbereitung und Validierung im entsprechenden Probensystem erfordern.
• Da die Kreuzreaktivität nur für Mensch nachgewiesen wurde, überprüfen Sie die Reaktivität bei anderen Arten, wenn Experimente mit mehreren Arten geplant sind.

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