Anti-RASSF5 Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8WWW0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RASSF5

• RASSF5, auch bekannt als NORE1 und RAPL, ist ein potenzieller Tumorsuppressor, der alternatives Spleißen durchläuft, wodurch unterschiedliche Isoformen mit Funktionen bei Apoptose und Zelladhäsion entstehen.
• Das Protein fungiert als Ras-Effektor und vermittelt die durch HRAS und KRAS induzierte Apoptose über den RASSF5-STK4/MST1-Komplex.
• Isoform 2 verbindet die RAP1A-Aktivierung nach TCR- oder Chemokin-Stimulation mit der Integrin-Aktivierung und fördert die Lymphozytenpolarisation und Adhäsion an ICAM1.
• RASSF5 ist an der Regulation des Mikrotubuluswachstums und der gerichteten Endothelzellmigration während der Wundheilung in Assoziation mit aktiviertem RAP1A beteiligt.
• Subzellulär lokalisiert sich RASSF5 im Zytoplasma und assoziiert mit dem Zytoskelett, was mit seiner Rolle bei Zelladhäsion und Migration übereinstimmt.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; das Protein enthält eine Zinkfingerdomäne und metallbindende Stellen.
• RASSF5 wird in vielen Geweben breit exprimiert und ist in Lungentumorzelllinien und primären Lungentumoren häufig herunterreguliert, was seine Rolle als Tumorsuppressor stützt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für die Western Blotung sollten Sie Ganzzelllysate von humanen, Maus- oder Rattenzelllinien in Betracht ziehen. Das Immunogen umfasst die N-terminalen 265 Aminosäuren und zielt auf eine Region ab, die wahrscheinlich über Spezies hinweg konserviert ist. Passen Sie daher Lyse und Antikörperverdünnung entsprechend an.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ca. 47 kDa. Führen Sie immer geeignete Molekulargewichtsmarkierungen durch und berücksichtigen Sie potenzielle posttranslationelle Modifikationen, die die Bande verschieben können.
• Im ELISA validieren Sie die Bindung mit rekombinantem RASSF5-Protein oder Peptid. Beachten Sie, dass die polyklonale Natur starke Signale erzeugen kann, aber auch potenzielle Kreuzreaktivität mit sich bringt.
• Aufgrund des Kontexts als Tumorsuppressor und der Herunterregulierung bei Lungenkrebs kann der Vergleich von Lysaten aus Normal- und Tumorgewebe informative Ergebnisse liefern.
• Da RASSF5 im Zytoplasma und Zytoskelett lokalisiert ist, kann eine subzelluläre Fraktionierung oder Immunfluoreszenz in Betracht gezogen werden, falls der Antikörper für solche Anwendungen validiert ist – obwohl aktuell nur WB und ELISA gelistet sind.
• Lagern Sie den Antikörper gemäß den Empfehlungen und vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen.

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