Anti-RASGRP1-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O95267

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RASGRP1-Funktion und -Lokalisierung

• RASGRP1 (RAS-Guanyl-Freisetzungstprotein 1), auch bekannt als CALDAG-GEFII, ist ein durch Kalzium und Diacylglycerol (DAG) regulierter Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor (GEF), der Ras spezifisch durch Katalyse des GDP/GTP-Austauschs aktiviert (PubMed:15899849, PubMed:23908768, PubMed:27776107). Verwandte Referenzen: PMID:15899849, PMID:23908768, PMID:27776107

• Es fungiert stromabwärts von Antigenrezeptoren, indem es die Aktivierung des T-Zell-Rezeptors (TCR) und des B-Zell-Rezeptors (BCR) mit Ras verknüpft und so die Entwicklung, Homöostase und Differenzierung von Lymphozyten reguliert (PubMed:10807788, PubMed:12839994, PubMed:27776107). Verwandte Referenzen: PMID:10807788, PMID:12839994, PMID:27776107

• In natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) vermittelt RASGRP1 die Zytotoxizität und die ITAM-abhängige Zytokinproduktion durch Aktivierung der Ras-ERK- und JNK-Signalwege (PubMed:19933860). Verwandte Referenzen: PMID:19933860

• In Mastzellen reguliert RASGRP1 die durch FcεRI ausgelöste Degranulation und Zytokinsekretion und trägt so zu allergischen Reaktionen bei (PubMed:12845332). Verwandte Referenzen: PMID:12845332

• Subzellulär lokalisiert sich RASGRP1 im Zytosol, auf der Zellmembran, der Golgi-Apparat-Membran und der Membran des endoplasmatischen Retikulums.

• Das Protein enthält eine Coiled-Coil-Domäne, eine RasGEF-Domäne und ein Paar Zinkfinger-Wiederholungen und wird durch Kalzium- und DAG-Bindung sowie durch Phosphorylierung reguliert.

• RASGRP1 wird im Gehirn (Kleinhirn, Großhirnrinde, Amygdala) und im hämatopoetischen System exprimiert, wobei die Proteinexpression in T-Zellen und NK-Zellen bestätigt wurde (PubMed:19933860). Verwandte Referenzen: PMID:19933860

• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, und Mutationen in RASGRP1 werden mit systemischem Lupus erythematodes (SLE) in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 598-797 von humanem RASGRP1; eine Validierung im entsprechenden Probenystem wird empfohlen.
• Für Western Blots ist ein Band bei ca. 90 kDa zu erwarten; Verwenden Sie geeignete Ladungskontrollen und erwägen Sie die Testung verschiedener Lysatmengen.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für den Zielzelltyp und das Epitop validiert werden.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte, was Studien in Nagetiermodellen ermöglicht; Bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen Setup.
• Für ELISAs titrieren Sie den Antikörper und kombinieren Sie ihn mit geeigneten Nachweisreagenzien, um die optimale Arbeitsverdünnung zu ermitteln.

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