Anti-RAPH1 Kaninchen-pAk für WB, IF/ICC, ELISA - Q70E73

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: RAPH1-Funktion und Lokalisierung

• RAPH1 (Ras-associated and pleckstrin homology domains-containing protein 1), auch bekannt als Lamellipodin, PREL-2 und ALS2CR18/ALS2CR9, enthält PH- und RA-Domänen, die typisch für Signaladapter sind, welche Membransignale mit dem Zytoskelett verknüpfen.
• Kernfunktion: Fungiert als Mediator lokalisierter Membransignale, reguliert kritisch die Dynamik von Lamellipodien und reguliert negativ die Zelladhäsion, wodurch Zellmotilität und Morphologie beeinflusst werden.
• Genfamilie und Isoformen: Kodiert durch das RAPH1-Gen; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, einschließlich RMO1 und RMO1-RAPH1, die unterschiedliche gewebespezifische Expressionsmuster aufweisen.
• Subzelluläre Lokalisierung: Gefunden an der Zellmembran und am Zytoskelett, mit Anreicherung in Lamellipodien und Filopodien – dynamische, auf Aktin basierende Ausstülpungen, die für Zellmigration und Adhäsion essentiell sind.
• Gewebeverteilung: Ubiquitär über alle Gewebe exprimiert; die Isoform RMO1-RAPH1 zeigt die höchsten Spiegel in Gehirn, Herz, Eierstock und dem sich entwickelnden Embryo, während die Isoform RMO1 am häufigsten in der Leber vorkommt und in B-Zellen niedrig ist.
• Posttranslationale Modifikationen: Unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung; kategorisiert als Phosphoprotein, und seine 3D-Struktur wurde experimentell bestimmt, was seine Rolle bei der Signalübertragung und dem Zytoskelett-Umbau unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der polyklonale Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fusionsprotein erzeugt, das die N-terminale Region (AS 1-240) des menschlichen RAPH1 abdeckt; erwägen Sie die Überprüfung der Spezifität des Isoform-Nachweises mittels Knockdown oder isoformspezifischer Transkriptanalyse.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 135 kDa; stellen Sie eine ausreichende Proteinextraktion aus frischen oder gut konservierten Proben sicher und ziehen Sie die Zugabe von Phosphatase-Inhibitoren in Betracht, um den Phosphorylierungszustand zu erhalten.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) wird eine Permeabilisierung empfohlen, um Zugang zu membranassoziierten und zytoskelettalen Pools zu erhalten; führen Sie geeignete Kontrollen durch, um spezifische von unspezifischen Signalen zu unterscheiden.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; bestätigen Sie bei der Verwendung dieser Spezies die Sequenzhomologie in der Immunogenregion und optimieren Sie die Bedingungen für jedes Modellsystem.

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