Anti-Rap1B-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P61224

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Rap1B-Funktion und Lokalisierung

• Rap1B (Ras-verwandtes Protein Rap-1b), auch bekannt als GTP-bindendes Protein smg p21B, ist ein Mitglied der Superfamilie der kleinen Ras-GTPasen.
• Beim Menschen wird das Protein durch das RAP1B-Gen (Gen-ID: 5908) kodiert und existiert aufgrund von alternatives Spleißen in mehreren Isoformen.
• Rap1B besitzt eine intrinsische GTPase-Aktivität und fungiert als molekularer Schalter in der Signaltransduktion, indem es zwischen einem aktiven GTP-gebundenen und einem inaktiven GDP-gebundenen Zustand zyklisch wechselt.
• Es spielt eine kritische Rolle bei der Polarität von Endothelzellen und der Bildung von Gefäßlumina, indem es zur polarisierenden Aktivität von KRIT1 und CDH5 beiträgt.
• Erforderlich für die Lokalisierung von phosphoryliertem PRKCZ, PARD3 und TIAM1 an den Zellkontakten, wodurch die basale endotheliale Barrierefunktion etabliert wird.
• Subzellulär lokalisiert sich Rap1B an der Zellmembran, im Zytosol und an den Zellkontakten.
• Das Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, darunter Prenylierung (Lipidmodifikation), Phosphorylierung und Methylierung, die seine Membranassoziation und Aktivität regulieren.
• Klinisch sind Mutationen im RAP1B-Gen mit Krankheitsvarianten assoziiert, was seine Bedeutung für die menschliche Gesundheit unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot verwenden Sie humane oder murine Zelllinien, die bekanntermaßen Rap1B exprimieren (z. B. Endothelzellen) als positive Kontrolle; eine Bande bei ca. 21 kDa wird erwartet.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC sollten Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimieren, um die Antigenzugänglichkeit zu erhalten, da sich Rap1B an der Zellmembran und den Zellkontakten befindet.
• Für ELISA kann der Antikörper gegen rekombinantes Rap1B-Protein (wie das Immunogen) getestet werden, um die Bindung zu bestätigen; titrieren Sie den Antikörper für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis.
• Aufgrund der polyklonalen Natur kann der Antikörper mehrere Rap1B-Isoformen oder verwandte Mitglieder der Rap-Familie erkennen; validieren Sie die Spezifität im entsprechenden Probenystem.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Mensch und Maus berichtet; bei Verwendung von Rattenproben führen Sie Vorversuche durch, um die Reaktivität zu verifizieren.

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