Anti-RANKL Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O14788

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von RANKL (TNFSF11)

• RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa-B Ligand), auch als TNFSF11, ODF, OPGL und TRANCE bezeichnet, ist ein Typ-II-Transmembranprotein, das zur Superfamilie der Tumornekrosefaktor-(TNF)-Liganden gehört.
• Als Zytokin ist es ein Hauptregulator der Differenzierung und Aktivierung von Osteoklasten durch Bindung an seinen Rezeptor RANK (TNFRSF11A) und den Decoy-Rezeptor OPG (TNFRSF11B) und steuert so den Knochenumbau.
• RANKL verbessert die Fähigkeit von dendritischen Zellen, die Proliferation naiver T-Zellen zu stimulieren, und ist an der Regulation der Interaktionen zwischen T-Zellen und dendritischen Zellen beteiligt, was auf eine Rolle bei der adaptiven Immunität hindeutet.
• Es fördert den pathologischen Knochenabbau bei der humoralen Hyperkalzämie bösartiger Tumoren und unterstreicht seine Bedeutung bei knochenassoziierten Krebserkrankungen. Verwandte Referenzen: PMID:22664871
• RANKL löst die Osteoklastogenese über Signalkaskaden aus, die anhaltende intrazelluläre Ca2+-Oszillationen erzeugen, was zur Aktivierung von NFATC1, zum nukleären Transport und zur Induktion der Transkription von osteoklastenspezifischen Genen führt.
• Das Protein lokalisiert sich in der Zellmembran und im Zytoplasma und kann durch alternatives Spleißen oder proteolytische Spaltung in einer löslichen Form (sRANKL) sezerniert werden.
• Die höchste Expression findet sich in peripheren Lymphknoten, mit mäßigen bis niedrigen Werten in Milz, peripheren Blutzellen, Knochenmark, Herz, Plazenta, Skelettmuskel, Magen und Schilddrüse.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, und das Molekül liegt sowohl in membrangebundenen als auch in löslichen Isoformen vor, die durch alternatives Spleißen und Shedding reguliert werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 78–317 von humanem RANKL und umfasst die extrazelluläre TNF-Homologiedomäne; daher wird erwartet, dass dieser Antikörper sowohl die membrangebundene als auch die lösliche Form (sRANKL) nachweist.
• Für das Western Blotting sollten Sie Lysate aus Geweben mit hoher RANKL-Expression wie Lymphknoten oder aktivierten T-Zellen in Betracht ziehen und unter reduzierenden Bedingungen validieren, um die ~35 kDa-Bande zu beobachten.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie ist eine geeignete Permeabilisierung für den zytoplasmischen Nachweis möglicherweise erforderlich; Kollokalisationsstudien mit Membranmarkern können helfen, die subzelluläre Verteilung zu bestätigen.
• Für ELISA kann dieser Antikörper als Erfassungs- oder Nachweisreagenz zur Quantifizierung von sRANKL in Zellkulturüberständen oder biologischen Flüssigkeiten geeignet sein; kreuzvalidieren Sie dies immer mit einer charakterisierten Standardkurve in Ihrer spezifischen Matrix.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde vermerkt; optimale Arbeitsverdünnungen und speziesenspezifische Validierungen sollten jedoch empirisch im relevanten Probensystem durchgeführt werden.

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