Anti-RALBP1-monoklonaler Antikörper für IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q15311

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RALBP1

• RALBP1, auch als RLIP76 oder Ral-interagierendes Protein 1 bekannt, ist ein multifunktionales Protein mit einer Größe von etwa 76 kDa, das vom RALBP1-Gen (GeneID: 10928) kodiert wird.
• Es wirkt als nachgeschalteter Effektor von RALA und RALB und fungiert als GTPase-aktivierendes Protein (GAP), das CDC42 und RAC1 durch Stimulierung ihrer intrinsischen GTPase-Aktivität inaktiviert. Zugehörige Referenzen: PMID:7673236
• Es ist an der Ral-Signalübertragungs-abhängigen Regulation der rezeptorvermittelten Endozytose beteiligt, einschließlich der ligandenabhängigen Internalisierung von EGF- und Insulinrezeptoren. Zugehörige Referenzen: PMID:10910768, PMID:12775724
• Während der Mitose dient es als Gerüst für die durch Cyclin B-CDK1 vermittelte Phosphorylierung von EPSIN/EPN1 und hemmt dadurch die Endozytose; außerdem erleichtert es die mitochondriale Spaltung, indem es als Gerüst für die Phosphorylierung von DNM1L an den Mitochondrien fungiert. Zugehörige Referenzen: PMID:12775724, PMID:21822277
• Es besitzt eine ATP-abhängige Transportaktivität für Glutathion-Konjugate und Xenobiotika wie Doxorubicin und kann dadurch möglicherweise zur Multidrug-Resistenz in Krebszellen beitragen.
• Es ist intrazellulär in mehreren Kompartimenten lokalisiert, darunter an der Zellmembran, im Zytosol, am Zytoskelett (Spindelpol), im Zellkern und in den Mitochondrien.
• Es wird ubiquitär in niedrigen Mengen exprimiert, mit besonders starker Expression in Erythrozyten.
• Es wird posttranslational durch Acetylierung und Phosphorylierung modifiziert und unter Schlüsselbegriffen wie ATP-Bindung, GTPase-Aktivierung und Translokase klassifiziert.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Der Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 200–300 umfasst. Es sollte berücksichtigt werden, dass das Epitop in der nativen Konformation teilweise verborgen sein kann, sodass für die Immunhistochemie möglicherweise eine Denaturierung oder eine geeignete Antigenrückgewinnung erforderlich ist.
• Für IHC-P werden eine standardmäßige hitzeinduzierte Epitoprückgewinnung (z. B. mit Citratpuffer, pH 6,0) und eine optimierte Konzentration des Primärantikörpers empfohlen. Die Validierung sollte in Spezies mit bestätigter Kreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte) erfolgen.
• Bei IF/ICC kann die Permeabilisierung mit 0,1–0,3 % Triton X-100 die Zugänglichkeit nukleärer oder mitochondrialer Antigene verbessern. Geeignete Negativkontrollen sollten eingeschlossen werden.
• ELISA-Anwendungen profitieren von einer Titration des Antikörpers gegen das Immunogenpeptid oder rekombinantes RALBP1-Protein, um die optimale Beschichtungskonzentration und den Nachweisbereich zu bestimmen.

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