Anti-RAG2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P55895

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des V(D)J-Rekombinations-aktivierenden Proteins 2

• Das V(D)J-Rekombinations-aktivierende Protein 2 (RAG2) ist eine Kernkomponente des RAG-Komplexes, der für die Zusammenstellung diverser Immunglobulin- und T-Zell-Rezeptor-Gene während der Lymphozytenentwicklung unerlässlich ist.
• RAG2 ist für alle katalytischen Aktivitäten von RAG1 erforderlich und vermittelt die DNA-Spaltung durch Nickbildung und Haarnadelbildung, um codierende und signalende Enden zu erzeugen.
• RAG2 fungiert als Sensor für den Chromatinzustand, indem es an an Lysin 4 trimethyliertes Histon H3 (H3K4me3) bindet, um sowohl den Nickbildungs- als auch den Haarnadelschritt zu stimulieren.
• Der RAG-Komplex trägt zur allelischen Exklusion von prä-B-Zellen bei, indem er eine ATM-abhängige Neupositionierung des nicht rekombinierten Allels in das perizentromerische Heterochromatin induziert.
• RAG2 lokalisiert im Zellkern, und seine Expression ist auf Zellen der B- und T-Lymphozytenlinien beschränkt.
• UniProt-Schlüsselwörter heben seine Rollen in der Chromatinregulation, DNA-Rekombination und die Krankheitsassoziation mit schwerer kombinierter Immundefizienz (SCID) hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 258-527, einen Bereich, der die C-terminale PHD-Fingerdomäne enthält, die für die H3K4me3-Erkennung kritisch ist; dies kann Antikörper hervorbringen, die die Volllänge und einige trunkierte Isoformen erkennen.
• Für den Western Blot (WB) sollten Sie die Verdünnung optimieren (häufig 1:500–1:2000 für polyklonale Antikörper) und geeignete Lysate von Lymphozytenlinienzellen als positive Kontrollen verwenden.
• In ELISA-Anwendungen verwenden Sie rekombinantes RAG2-Protein oder Peptid als Beschichtungsantigen; die Kreuzreaktivität mit Maus-RAG2 ermöglicht die Validierung in murinen Systemen.
• Aufgrund der polyklonalen Natur bestätigen Sie bitte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz und validieren Sie im spezifischen Probensystem (z. B. primäre Lymphozyten, Thymozyten), um die erwartete Leistung sicherzustellen.

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