Anti-RAD51C polyklonaler Antikörper für IF/ICC und ELISA - O43502

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von RAD51C

• RAD51C, auch bekannt als DNA-Reparaturprotein RAD51-Homolog 3 oder RAD51L2, ist ein Mitglied der RAD51-Paralogenfamilie und an der homologen Rekombinationsreparatur (HR) von DNA-Doppelstrangbrüchen beteiligt.
• Es ist eine Kernkomponente der BCDX2-Komplexe (RAD51B-RAD51C-RAD51D-XRCC2) und CX3-Komplexe (RAD51C-XRCC3), die in unterschiedlichen Phasen des BRCA1-BRCA2-abhängigen HR-Signalwegs wirken, von der Rekrutierung von RAD51 bis zur Auflösung von Holliday-Junctions.
• RAD51C spielt eine frühe Rolle bei der Signalübertragung von DNA-Schäden, indem es die Phosphorylierung von CHEK2 erleichtert, was zum Zellzyklusarrest und zur Aktivierung der HR führt, und ist außerdem an der Migration von Verzweigungen und der Auflösung von HJ in späten Phasen beteiligt.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, das Zytoplasma, die perinukleäre Region und die Mitochondrien, was seine vielfältigen Rollen bei der Aufrechterhaltung des Genoms und der Regulierung der mitochondrialen DNA-Kopienzahl unter oxidativem Stress widerspiegelt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die Phosphorylierung. RAD51C wird unter Schlüsselwörtern wie DNA-Schädigung, DNA-Rekombination, DNA-Reparatur und Fanconi-Anämie klassifiziert; Mutationen in RAD51C stehen mit der Komplementationsgruppe O der Fanconi-Anämie und der Anfälligkeit für Brustkrebs in Verbindung.
• RAD51C wird umfassend exprimiert, wobei die höchsten Konzentrationen in Hoden, Herzmuskel, Milz und Prostata vorliegen, was mit seiner entscheidenden Funktion bei der meiotischen Rekombination und in proliferierenden Geweben übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-135) des humanen RAD51C. Der Antikörper kann Epitope innerhalb dieser konservierten Domäne erkennen und könnte sich für den Nachweis sowohl vollständiger als auch verkürzter Isoformen eignen.
• Für IF/ICC-Anwendungen sollten Sie in Betracht ziehen, Zellen mit Paraformaldehyd zu fixieren und mit einem Detergens zu permeabilisieren, um den Zugang zum Zellkern zu ermöglichen, da RAD51C zwischen Zytoplasma und Zellkern pendelt.
• Beim ELISA kann die polyklonale Natur eine hohe Sensitivität ermöglichen. Es werden jedoch Kreuzabsorption oder Blockierungsschritte empfohlen, um Hintergrundsignale durch andere RAD51-Paralogen mit Sequenzhomologie zu minimieren.
• Validieren Sie die Spezies-Kreuzreaktivität sorgfältig. Dieser Antikörper wurde gegen humanes RAD51C hergestellt, und die Kreuzreaktivität ist ausschließlich für den Menschen angegeben. Die Leistung bei anderen Spezies sollte bei Bedarf experimentell bestätigt werden.
• Aufgrund des Molekulargewichts von etwa 42 kDa sollten geeignete vorgefärbte Marker verwendet und die Bandenidentität mit positiven und negativen Zelllysaten bestätigt werden, bei denen die RAD51C-Expressionswerte bekannt sind, beispielsweise aus Hoden- oder Krebszelllinien.

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