Anti-Rad50 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA - Q92878

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RAD50-Funktion und -Lokalisation

• RAD50 ist eine Kernkomponente des MRN-Komplexes (MRE11-RAD50-NBS1) und spielt eine zentrale Rolle bei der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen, homologer Rekombination, Telomerintegrität und Meiose.
  Verwandte Referenzen: PMID:15064416, PMID:21757780, PMID:27889449
• Der MRN-Komplex vermittelt die DNA-Endresektion und erzeugt einzelsträngige DNA, die für die homologe Rekombination entscheidend ist, und erleichtert die Rekrutierung von Reparaturfaktoren und die Aktivierung von ATM/ATR-Kinasen nach DNA-Schäden.
  Verwandte Referenzen: PMID:15064416, PMID:27889449, PMID:28867292, PMID:15790808, PMID:16622404
• Der Komplex besitzt Einzelstrang-Endonuklease- und Doppelstrang-3′-5′-Exonuklease-Aktivitäten (bereitgestellt durch MRE11), während RAD50 DNA-Enden bindet und verankert, um die MRE11-Aktivität zu regulieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:11741547, PMID:9590181, PMID:9651580, PMID:12805565, PMID:28134932
• RAD50 enthält ATP-Bindungsdomänen; ATP-Bindung induziert eine geschlossene Konformation, die DNA-Enden optimal innerhalb der MRE11-aktiven Stelle positioniert (durch Ähnlichkeit).
• RAD50 ist überwiegend nukleär lokalisiert, an Chromosomen-Telomeren und Stellen von DNA-Schäden; es beteiligt sich auch an der Verarbeitung von R-Schleifen und der Modulation der T-Schleifen-Bildung.
  Verwandte Referenzen: PMID:10888888, PMID:31537797
• RAD50 wird in den meisten Geweben niedrig exprimiert, mit erhöhter Expression in Testis und Fibroblasten.
• RAD50 unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung und ist durch ATP-Bindungs-, Coiled-Coil-, Zink-Bindungs- und Hydrolase-Motive charakterisiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Western-Blot-Analyse ist ein Band nahe 154 kDa zu erwarten. Verwenden Sie eine geeignete positive Kontrolllysate aus humanen, murinen oder Rattenzellen und schließen Sie eine Ladekontrolle ein.
• Für IHC-P an Paraffin-eingebetteten Schnitten können Standard-Antigen-Retrieval-Methoden (z.B. hitzeinduzierte Epitop-Demaskierung) in Betracht gezogen werden; Pilotexperimente werden empfohlen.
• Für die Immunpräzipitation (IP) verwenden Sie Standardprotokolle mit Vorreinigungs-Schritten; der Antikörper eignet sich zum Herausziehen endogener RAD50-Komplexe aus Kernextrakten.
• Für ELISA kann das Peptid-Immunogen (N-terminale Reste 1-100) zur Validierung des Antikörpertiters verwendet werden; Kreuzreaktivität mit eng verwandten Proteinen sollte durch Sequenzalignment ausgeschlossen werden.
• Aufgrund seiner kreuzspezifischen Reaktivität kann dieser Antikörper für vergleichende Studien in humanen, murinen und Rattenmodellen der DNA-Reparatur eingesetzt werden.

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