Anti-RAD50 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q92878

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RAD50-Funktion und -Lokalisierung

• RAD50 (DNA-Reparaturprotein RAD50), auch bekannt als NBSLD oder hRad50, ist eine Kernkomponente des MRN-Komplexes (MRE11-RAD50-NBN), der die zellulären Antworten auf DNA-Doppelstrangbrüche orchestriert.
• Der MRN-Komplex ist für die Reparatur von Doppelstrangbrüchen durch homologe Rekombination unerlässlich, wobei er die DNA-Endresekation vermittelt, um für den Stranginvasion notwendige Einzelstrang-DNA zu erzeugen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:15064416
  PMID:21757780
  PMID:27889449
• RAD50 bindet und verankert DNA-Enden, und sein ATP-abhängiger Strukturwechsel steuert die Nukleaseaktivität von MRE11 und positioniert die DNA-Substrate für die Spaltung.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:11741547
  PMID:12805565
  PMID:28134932
• Darüber hinaus aktiviert der MRN-Komplex die Kinase ATM und ATR, um DNA-Schadenssignale zu übertragen, eine Funktion, die unabhängig von der Nukleaseaktivität von MRE11 ist.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:15064416
  PMID:15790808
  PMID:16622404
• An Telomeren moduliert der MRN-Komplex die Bildung von T-Schleifen und trägt zur Integrität und Längenregulation der Telomere bei.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:10888888
• RAD50 ist auch an der Verarbeitung von R-Schleifen beteiligt, indem es Transkriptions-Replikationskonflikte löst, um die genomische Stabilität zu erhalten.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:31537797
• Subzellulär lokalisiert sich RAD50 primär im Zellkern und assoziiert mit Chromatin und Telomeren.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und Interaktionen als Reaktion auf DNA-Schäden regulieren können.
• Die Gewebeexpression ist allgemein niedrig, mit einer bemerkenswerten Anreicherung in den Hoden und nachweisbaren Spiegeln in Fibroblasten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (aa 1200-1300) außerhalb der konservierten ATPase- und Coiled-Coil-Domänen; erwägen Sie die Überprüfung der Spezifität durch Knockdown- oder Knockout-Kontrollen in relevanten Probentypen.
• Für Western Blot läuft RAD50 bei ca. 154 kDa; verwenden Sie einen geeigneten Gel-Prozentsatz (z. B. 6% Trenngel) und sorgen Sie für einen effizienten Transfer dieses großen Proteins (z. B. durch verlängerte nasse Transferzeiten).
• Es wird berichtet, dass der Antikörper mit humanem, murinem und rattem RAD50 reagiert; die Kreuzreaktivität mit dem endogenen Protein dieser Spezies sollte unter Ihren experimentellen Bedingungen validiert werden.
• Bei ELISA-Anwendungen sollten die optimalen Beschichtungsbedingungen und Detektionsbereiche empirisch unter Verwendung des Peptidimmunogens oder des全长-rekombinanten Proteins als Standard bestimmt werden.

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