Anti-Rad50-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q92878

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Rad50-Funktion und Lokalisierung

• RAD50 ist eine Komponente des MRN-Komplexes (zusammen mit MRE11 und NBN), der eine zentrale Rolle bei der Reparatur von Doppelstrangbrüchen (DSB), der DNA-Rekombination und der Erhaltung der Integrität von Telomeren spielt (PubMed:15064416, PubMed:21757780, PubMed:27889449). Verwandte Referenzen: PMID:15064416 PMID:21757780 PMID:27889449
• Der MRN-Komplex ist für die Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen durch homologe Rekombination (HR) unerlässlich, ein fehlerfreier Mechanismus, der hauptsächlich in der S- und G2-Phase stattfindet (PubMed:15064416, PubMed:21757780). Verwandte Referenzen: PMID:15064416 PMID:21757780
• RAD50 trägt zur DNA-Endresektronisierung bei, indem es an DNA-Enden bindet und die Exonuklease-/Endonuklease-Aktivitäten von MRE11 reguliert; Die ATP-Bindung induziert einen Konformationswechsel, der die Zugänglichkeit der MRE11-Nuklease steuert (PubMed:11741547, PubMed:12805565, PubMed:28134932). Verwandte Referenzen: PMID:11741547 PMID:12805565 PMID:28134932
• Der MRN-Komplex vermittelt auch die DNA-Schadenssignalisierung durch Aktivierung der ATM- und ATR-Kinasen, eine Funktion, die unabhängig von der Nukleaseaktivität von MRE11 ist (PubMed:15064416, PubMed:15790808, PubMed:16622404). Verwandte Referenzen: PMID:15064416 PMID:15790808 PMID:16622404
• RAD50 lokalisiert im Zellkern und wird an den Chromosom-Telomeren gefunden, wo es die Bildung von t-Schleifen (t-loops) modulieren kann (PubMed:10888888). Verwandte Referenzen: PMID:10888888
• Die Expression von RAD50 ist in den meisten Geweben sehr niedrig, wobei höhere Spiegel in Hoden und Fibroblasten beobachtet werden.
• RAD50 unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, und verfügt über ATP-bindende, Coiled-Coil- und Zink-bindende Domänen (UniProt-Schlüsselwörter).
• Der MRN-Komplex verarbeitet auch R-Schleifen (R-loops) und trägt so zur genomischen Stabilität bei (PubMed:31537797). Verwandte Referenzen: PMID:31537797

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem N-terminalen Bereich (aa 1-270) von menschlichem RAD50; daher wird erwartet, dass der Antikörper das N-Terminus des Proteins erkennt.
• Für Western Blot (WB) wandert RAD50 bei ~154 kDa; Stellen Sie eine ordnungsgemäße SDS-PAGE-Trennung und Transferbedingungen (z. B. verlängerte Transferzeiten) für hochmolekulare Proteine sicher.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) validieren Sie die Färbung in menschlichen Hoden- oder Fibroblastenproben, die eine höhere RAD50-Expression aufweisen; Berücksichtigen Sie eine Optimierung der Antigen-Retrieval.
• Für ELISA kann das synthetische Peptid-Immunogen als Positivkontrolle dienen, um die Reaktivität des Antikörpers zu bestätigen; Die Leistung auf endogenem全长-Protein sollte unabhängig validiert werden.
• Angesichts der zentralen Rolle von RAD50 bei der DNA-Reparatur und Telomerbiologie kann dieser Antikörper bei Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) oder DNA-Schadensfokus-Assays helfen, obwohl solche Anwendungen mit diesem Produkt nicht validiert wurden und eine Optimierung durch den Benutzer erfordern.

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