Anti-RAB8A Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P61006

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von RAB8A

• RAB8A ist eine kleine GTPase, die zwischen inaktiver GDP-gebundener und aktiver GTP-gebundener Konformation zyklisiert und fungiert als Hauptregulator des intrazellulären Membrantransports, des polarisierten vesikulären Transports und der Neurotransmitterfreisetzung.
• Fördert die Transzytose von PODXL zu den apikalen Membraninitiationsstellen (AMIS) und treibt die Bildung der apikalen Oberfläche und Lumenogenese gemeinsam mit RAB11A, dem Exozyst-Komplex und Polaritätsproteinen an. Verwandte Referenzen: PMID:20890297
• Steuert die kompakte Morphologie des Golgi-Apparats und beeinflusst dadurch die Golgi-Organisation und Ladungsverarbeitung. Verwandte Referenzen: PMID:26209634
• Arbeitet gemeinsam mit MYO5B und RAB11A an der Etablierung der epithelialen Zellpolarisation, die für Gewebearchitektur und -funktion essenziell ist. Verwandte Referenzen: PMID:21282656
• Nimmt am Membrantransport zum Primärzilium teil und ist für die Ciliogenese erforderlich, mit Bedeutung für Signalgebung und Entwicklung. Verwandte Referenzen: PMID:21844891 PMID:30398148 PMID:20631154
• Spielt eine Rolle bei der Autophagie und trägt zur Sequestrierung und Degradation zytoplasmatischer Komponenten bei. Verwandte Referenzen: PMID:27103069
• Bei lysosomalem Stress wird RAB8A durch LRRK2-vermittelte Phosphorylierung rekrutiert und stabilisiert, wodurch es stressinduzierte lysosomale Vergrößerung über EHBP1/EHNP1L1-Effektoren unterdrückt. Verwandte Referenzen: PMID:30209220
• Weist eine breite subzelluläre Lokalisierung auf, darunter Plasmamembran, Golgi, Endosomen, Recycling-Endosomen, Zilium, Phagosomen, Zentrosom, Midbody und Lysosomen, was seine vielseitigen Transportfunktionen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 140–207 von humanem RAB8A (NP_005361.2), eine Region, die wahrscheinlich Antikörper erzeugt, die sowohl die volle Länge als auch eventuell Spleißvarianten erkennen; überprüfen Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen (z. B. siRNA-Knockdown oder Knockout-Lysate).
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande von etwa 24 kDa entsprechend dem berechneten Molekulargewicht zu erwarten; verwenden Sie ein SDS-PAGE-Gel mit geeignetem Prozentsatz für niedermolekulare Proteine und erwägen Sie bei schwachen endogenen Signalen eine Überexpression oder Anreicherung.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC) ist ein Färbemuster zu erwarten, das der vielfältigen Lokalisierung von RAB8A entspricht (zytoplasmatische Vesikel, Golgi, Plasmamembran, Zilien); validieren Sie die Kolokalisierung mit Organellenmarkern.
• Bei ELISA sorgen Sie für eine korrekte Beschichtung mit dem rekombinanten Immunogen oder nativen Protein aus Zell-/Gewebslysaten und führen Sie eine Titration durch, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-RAB8A ist angegeben; dennoch sollte die Konservierung des Epitops bestätigt werden, wenn Sie mit anderen Spezies oder eng verwandten Mitgliedern der RAB-Familie (z. B. RAB10, RAB13) arbeiten.

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