Anti-RAB45-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB und ELISA – Q8IZ41

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Ras- und EF-Hand-Domänen enthaltenden Proteins

• RASEF (RAB45) kodiert eine zur RAS-Superfamilie gehörende Rab-GTPase, die durch eine einzigartige Kombination aus Ras- und EF-Hand-Domänen charakterisiert ist und durch alternatives Spleißen mehrere Isoformen erzeugt.
• Die primäre Funktion von RASEF besteht darin, als Dynein-Adapterprotein zu fungieren und den Dynein-vermittelten Transport sowie die Dynein-Dynactin-Motilität auf Mikrotubuli unabhängig von Ca(2+) zu aktivieren. Verwandte Referenz: PMID:30814157
• RASEF reguliert außerdem die Bildung und Sortierung von Zymogengranula sowie die Sekretion von Verdauungsenzymen durch Pankreasazinuszellen und trägt dadurch zur Funktion des exokrinen Pankreas bei.
• Auf subzellulärer Ebene ist RASEF im perinukleären Zytoplasma, im Golgi-Apparat, in frühen und späten Endosomen sowie in Lysosomen lokalisiert, was auf eine Beteiligung am intrazellulären Vesikeltransport hinweist.
• Das Protein enthält Calcium-bindende EF-Hand-Motive und GTP-bindende Domänen und wird, wie durch seine Schlüsselwörter angezeigt, durch Nukleotidbindung und Phosphorylierung reguliert.
• Die Analyse der Gewebespezifität zeigt, dass RASEF in kutanen Melanomzellen herunterreguliert ist, was auf eine mögliche Rolle in der Melanozytenbiologie oder Tumorsuppression hindeutet.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus den N-terminalen 120 Aminosäuren, die der Ras-ähnlichen Domäne zugeordnet sind. Dies kann aufgrund der hohen Sequenzhomologie die Erkennung konservierter Epitope in humanen und murinen Spezies ermöglichen.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 83 kDa. Verwenden Sie vorzugsweise Gesamtzelllysate aus humanen oder murinen Zelllinien (z. B. HeLa, NIH/3T3) oder Pankreasgewebe und validieren Sie die Ergebnisse mit geeigneten Ladekontrollen.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Einfangen oder Nachweisen von rekombinantem oder endogenem RAB45 verwendet werden. Optimieren Sie gegebenenfalls die Beschichtungsbedingungen und überprüfen Sie die Spezifität mithilfe von Standards aus rekombinantem Protein.
• Da eine Kreuzreaktivität mit Mensch und Maus berichtet wurde, kann dieser Antikörper translationale Studien unterstützen. Dennoch sollte die Reaktivität im relevanten Probensystem vor quantitativen Untersuchungen stets bestätigt werden.
• Aufgrund der Dynein-Adapterfunktion des Proteins könnten Forschende den Antikörper für Co-Immunpräzipitations- oder Proximity-Ligation-Assays zur Untersuchung von Proteininteraktionen einsetzen, obwohl diese Anwendungen für dieses Produkt nicht validiert wurden.

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